"639V Cell|人膀胱癌細胞

細胞背景資料：膀胱癌；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

HL1細胞類似產(chǎn)品：：EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞

PIGI細胞類似產(chǎn)品：：GTL 16細胞、OVCAR-432細胞、SNU-387細胞

H-1092細胞類似產(chǎn)品：：Hs 863.T細胞、SCL II細胞、H1573細胞

ME-1 [Human leukemia]細胞類似產(chǎn)品：：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、SUDHL10細胞、H1238細胞

FRTL 5細胞類似產(chǎn)品：：HeLa細胞、DI-TNC1細胞、8226/S細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

639V Cell|人膀胱癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞類似產(chǎn)品：：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞

RIN-m5F細胞類似產(chǎn)品：：NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞

GM2132細胞類似產(chǎn)品：：CCD 841 CoTr細胞、H2347細胞、WEHI-3細胞

GM06141B細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞類似產(chǎn)品：：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞

RIN-m5F細胞類似產(chǎn)品：：NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞

GM2132細胞類似產(chǎn)品：：CCD 841 CoTr細胞、H2347細胞、WEHI-3細胞

GM06141B細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞傳代比例：對于有限細胞系，傳代時以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細胞密度，計算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對應(yīng)1次倍增，4對應(yīng)2次倍增，8對應(yīng)3次倍增，16對應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達到原來相同的細胞密度。脆弱的或生長緩慢的細胞系通常一傳二，而有活力的，生長快速的細胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細胞系可一傳五十或一傳100。一旦細胞系變?yōu)檫B續(xù)細胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時要保證：細胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時以內(nèi))，可重新進入生長周期；而且在下次傳代前不進人平臺期。

MPC-83細胞類似產(chǎn)品：：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞

SKNEP1細胞類似產(chǎn)品：：PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞

HUC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞

MPASMC細胞類似產(chǎn)品：：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞

MX-1細胞類似產(chǎn)品：：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞

HNE2細胞類似產(chǎn)品：：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞

Be-Wo細胞類似產(chǎn)品：：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞

293AD細胞類似產(chǎn)品：：AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞

H1404細胞類似產(chǎn)品：：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞

RKOAS451細胞類似產(chǎn)品：：T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞

639V Cell|人膀胱癌細胞

BV-173細胞類似產(chǎn)品：：Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞

A9 (Hamprecht)細胞類似產(chǎn)品：：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞

P116細胞類似產(chǎn)品：：MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞

THLE-3細胞類似產(chǎn)品：：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞

rRTEC細胞類似產(chǎn)品：：H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞

P3-X63.Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞

MN-60細胞類似產(chǎn)品：：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞

THLE-3細胞類似產(chǎn)品：：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞

BRL-3A細胞類似產(chǎn)品：：Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞

Tu212細胞類似產(chǎn)品：：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞

CHL/IU細胞類似產(chǎn)品：：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞

K422細胞類似產(chǎn)品：：N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞

FT-293細胞類似產(chǎn)品：：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞

RPMI8226細胞類似產(chǎn)品：：TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞

HN 4細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞

LS-411N細胞類似產(chǎn)品：：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞

PG-4(S+L-)細胞類似產(chǎn)品：：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞

SW1990細胞類似產(chǎn)品：：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞

COLO.205細胞類似產(chǎn)品：：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞

CHL/IU細胞類似產(chǎn)品：：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞

PNT1A細胞類似產(chǎn)品：：RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞

NIT-1細胞類似產(chǎn)品：：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞

OCI-AML2細胞類似產(chǎn)品：：COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞

HEK/EBNA細胞類似產(chǎn)品：：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞

MM6細胞類似產(chǎn)品：：Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞

JeKo-1細胞類似產(chǎn)品：：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞

SW1783細胞類似產(chǎn)品：：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞

SNU739細胞類似產(chǎn)品：：CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞

MPC-83細胞類似產(chǎn)品：：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞

639V Cell|人膀胱癌細胞

SUM-52細胞類似產(chǎn)品：：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞

SUM190細胞類似產(chǎn)品：：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞

RPMI 1788細胞類似產(chǎn)品：：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞

Bowes melanoma cells細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞

Wistar Institute, Susan Hayflick細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞

D341MD細胞類似產(chǎn)品：：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞

U373MG細胞類似產(chǎn)品：：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞

WEHI-3B細胞類似產(chǎn)品：：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞

HL7702細胞類似產(chǎn)品：：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞

Glioma-261細胞類似產(chǎn)品：：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞

Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞類似產(chǎn)品：：GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞

159PT細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞

ACC-M細胞類似產(chǎn)品：：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞

LAN5細胞類似產(chǎn)品：：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞

Hs 839.T細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞

NCIH838細胞類似產(chǎn)品：：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞

Sf21細胞類似產(chǎn)品：：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞

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