"OVTOKO Cell|人卵巢透明細胞癌細胞

細胞背景資料：卵巢透明細胞癌；脾轉(zhuǎn)移；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

LS-174T細胞類似產(chǎn)品：：H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞

C2BBe 1細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-510細胞、MRC5細胞、NCI-H125細胞

OLN 93細胞類似產(chǎn)品：：Co320細胞、H-1693細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞

SUDHL8細胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly19細胞、MOLT 3細胞、MDA 1386細胞

GM02131A細胞類似產(chǎn)品：：SNU-368細胞、YES2細胞、COLO-320DM細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OVTOKO Cell|人卵巢透明細胞癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

AM38細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞

U138細胞類似產(chǎn)品：：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞

SW 1222細胞類似產(chǎn)品：：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞

WEHI-279細胞類似產(chǎn)品：：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

AM38細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞

U138細胞類似產(chǎn)品：：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞

SW 1222細胞類似產(chǎn)品：：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞

WEHI-279細胞類似產(chǎn)品：：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

WM 451-Lu細胞類似產(chǎn)品：：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞

NIH:OVCAR-3細胞類似產(chǎn)品：：Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞

NCM356細胞類似產(chǎn)品：：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞

HR8348細胞類似產(chǎn)品：：DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞

RSC-96細胞類似產(chǎn)品：：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞

FUOV1細胞類似產(chǎn)品：：COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞

IOSE-80細胞類似產(chǎn)品：：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞

C17.2細胞類似產(chǎn)品：：U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞

HCC 94細胞類似產(chǎn)品：：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞

WM-451Lu細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞

OVTOKO Cell|人卵巢透明細胞癌細胞

Hs-578-T細胞類似產(chǎn)品：：H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞

RD細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞

H-1975細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞

HCT-15細胞類似產(chǎn)品：：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞

SK-MEL-24細胞類似產(chǎn)品：：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞

MO59J細胞類似產(chǎn)品：：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞

MO59J細胞類似產(chǎn)品：：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞

MESSADX5細胞類似產(chǎn)品：：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞

H295細胞類似產(chǎn)品：：T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞

SF-763細胞類似產(chǎn)品：：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞

KTC1細胞類似產(chǎn)品：：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞

SNU423細胞類似產(chǎn)品：：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞

SK.MEL.5細胞類似產(chǎn)品：：Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞

HME-1細胞類似產(chǎn)品：：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞

JB6 Cl 30細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞

OVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞

U-343 MG細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞

JEG3細胞類似產(chǎn)品：：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞

HuT 102細胞類似產(chǎn)品：：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞

PK 15細胞類似產(chǎn)品：：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞

NCI-H220細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞

CCRF/CEM/0細胞類似產(chǎn)品：：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞

FHCRC subclone 11細胞類似產(chǎn)品：：3T3細胞、OCM-1A細胞、ARO81細胞

FHCRC subclone 11細胞類似產(chǎn)品：：3T3細胞、OCM-1A細胞、ARO81細胞

OE21細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞

LTEPa2細胞類似產(chǎn)品：：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞

OVCAR-432細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞

AU-565細胞類似產(chǎn)品：：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞

LAN5細胞類似產(chǎn)品：：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞

OVTOKO Cell|人卵巢透明細胞癌細胞

bEnd3細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞

PC 61.5.3細胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞

WM 266-4細胞類似產(chǎn)品：：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞

HMVEC細胞類似產(chǎn)品：：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞

Epstein-Barr-1細胞類似產(chǎn)品：：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞

H-2106細胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細胞、SBC-5細胞、C4 I細胞

HN 4細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞

SPCA-1細胞類似產(chǎn)品：：Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞

KBM7細胞類似產(chǎn)品：：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞

KYSE-70細胞類似產(chǎn)品：：HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞

GLC-82細胞類似產(chǎn)品：：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞

LS180細胞類似產(chǎn)品：：SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞

BL1339細胞類似產(chǎn)品：：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞

beta TC6細胞類似產(chǎn)品：：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞

H-735細胞類似產(chǎn)品：：P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞

SMMC7721細胞類似產(chǎn)品：：CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞

NEC8細胞類似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞

"