"OVTOKO Cell|人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：卵巢透明細(xì)胞癌；脾轉(zhuǎn)移；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿(mǎn)器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

LS-174T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H4-II-EC3細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞

C2BBe 1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KYSE-510細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞

OLN 93細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Co320細(xì)胞、H-1693細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞

SUDHL8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI Ly19細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞

GM02131A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU-368細(xì)胞、YES2細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

OVTOKO Cell|人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿(mǎn)培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿(mǎn)的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類(lèi)型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

AM38細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞

U138細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞

SW 1222細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞

WEHI-279細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

AM38細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞

U138細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞

SW 1222細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞

WEHI-279細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

WM 451-Lu細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞

NIH:OVCAR-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Super Tube細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞、IMR32細(xì)胞

NCM356細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞

HR8348細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞

RSC-96細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞

FUOV1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞

IOSE-80細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞

C17.2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞

HCC 94細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：624mel細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞

WM-451Lu細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞

OVTOKO Cell|人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞

Hs-578-T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞

RD細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA MB231細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞

H-1975細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞

HCT-15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞

SK-MEL-24細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞

MO59J細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞

MO59J細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞

MESSADX5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞

H295細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞

SF-763細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞

KTC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞

SNU423細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞

SK.MEL.5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞

HME-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞

JB6 Cl 30細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞

OVCAR3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞

U-343 MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MGH-U3 (RN)細(xì)胞、H735細(xì)胞、H1385細(xì)胞

JEG3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞

HuT 102細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞

PK 15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞

NCI-H220細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞

CCRF/CEM/0細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞

FHCRC subclone 11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞

FHCRC subclone 11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞

OE21細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H508細(xì)胞、ECV304細(xì)胞、H64細(xì)胞

LTEPa2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞

OVCAR-432細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-N-BE細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞

AU-565細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞

LAN5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞

OVTOKO Cell|人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞

bEnd3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-LY-7細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞

PC 61.5.3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞

WM 266-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CMT 167細(xì)胞、SNU484細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞

HMVEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI H226細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞、H4細(xì)胞

Epstein-Barr-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞

H-2106細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞

HN 4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞

SPCA-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs-688A-T細(xì)胞、BC-020細(xì)胞、CAL62細(xì)胞

KBM7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞

KYSE-70細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞

GLC-82細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C2C12細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞

LS180細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞

BL1339細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞

beta TC6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞

H-735細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞

SMMC7721細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CTLA4Ig-24細(xì)胞、C-6細(xì)胞、GM07404細(xì)胞

NEC8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞

"