"RMC Cell|大鼠腎系膜細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：腎系膜

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

NCI-H711細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞

HGBEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BEAS-2B細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BT549細(xì)胞

MLOY4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PC615.3細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、b.End3細(xì)胞

HEL92.1.7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MLMEC細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞

IM 9細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H841細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

RMC Cell|大鼠腎系膜細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類(lèi)型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

MB 157細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞

BJ1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞

MES-SA-Dx5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞

P36細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

MB 157細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞

BJ1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞

MES-SA-Dx5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞

P36細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類(lèi)，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見(jiàn)的變化，或者通過(guò)顯微鏡觀察就可以看見(jiàn)。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒(méi)能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

Tu 177細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KP-4細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞、H-82細(xì)胞

Colo16細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞

HeLa S3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H82細(xì)胞、H676B細(xì)胞、Mink細(xì)胞

DH-82細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞

L78細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞

526mel細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞

NCI-SNU-423細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CNE2細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞

Earles's cells細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BC3 H1細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞

OAW 42細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞

ARH77細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞

RMC Cell|大鼠腎系膜細(xì)胞

SACC-LM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HIEC6細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞

CHL-CL-11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞

ESC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Y-79細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞

NCI-H1385細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞

IBRS2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞

RPPVEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞

RPPVEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞

OSC-19細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞

Soleus clone 8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞

OAC-P4C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞

NBL-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞

PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞

NT2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞

NIT-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NPA 87細(xì)胞、Co-115細(xì)胞、HCC202細(xì)胞

AR4-2J細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞

KCL-22細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞

HCC0038細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U-373MG細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞、J-774細(xì)胞

MDCK (NBL-2)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KMS-26細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞

RBMEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞

MGH-U1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞

RPMI 8226細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞

CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞

Panc05.04細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞

PA-TU S細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H322T細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞

HPDEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：COLO_320DM細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞

AAV293細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：COS1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞

HCT FET細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞

CCRF-CEM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU-601細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞

MRC-V細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞

RMC Cell|大鼠腎系膜細(xì)胞

P388細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞

Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞

RPMI no. 8226細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞

U-373 MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L-132細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞、GS9L細(xì)胞

FL 62891細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞

MC-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞

AM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞

CNE-2Z細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞

SW-1088細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞

NRK49F細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞

Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞

MKN28細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞

SUP-B15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NK-92.05細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞

TCMK-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L-02細(xì)胞、LM1細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞

BxPC-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI-7666細(xì)胞、M 1細(xì)胞、H-345細(xì)胞

VM-CUB-I細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SHIN-3細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞

MO59J細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞

"