"KYSE-50 Cell|低分化人食管鱗癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：食管鱗癌；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

NR8383.1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH520細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞、A2058細(xì)胞

Panc 02細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：T47-D細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞

PIEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-SH-SY5Y細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞

U-hth74細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MEL-526細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞

H1650細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Jurkat E6.1細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、HEB細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

KYSE-50 Cell|低分化人食管鱗癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶(hù)遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Pro-5WgaRI3C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞

KYSE 70細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：REC細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞

CHO-Lec1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞

A2780/CP細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HGC-27細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

Pro-5WgaRI3C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞

KYSE 70細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：REC細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞

CHO-Lec1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞

A2780/CP細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HGC-27細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來(lái)相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過(guò)150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過(guò)低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以?xún)?nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

RPMI-1788細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞

MMAc.SF細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞

Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21細(xì)胞、VP 267細(xì)胞、KBM5細(xì)胞

I90細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MES 13細(xì)胞、SW1463細(xì)胞、INS-1細(xì)胞

SKNBE(2)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞

FTC-133細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞

P3HR-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CA-OV-3細(xì)胞、REC 1細(xì)胞、KMS11細(xì)胞

Rat 2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：AR4IP細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞

MDCK-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Ku812F細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞

MADB106細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：JEG3細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞

KYSE-50 Cell|低分化人食管鱗癌細(xì)胞

HDLM2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞

U-hth74細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞

Anip-973細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞

KYSE30細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞

RS 4;11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞

GM05384細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RWPE1細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞、SW403細(xì)胞

GM05384細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RWPE1細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞、SW403細(xì)胞

UPCI-SCC-090細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞

Hs819T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HS-766-T細(xì)胞、U2OS細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞

Oregon J-111細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞

MDA436細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UMR106細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞

H-748細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞

Henrietta Lacks cells細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞

MBT2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞

NCIH1930細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs888Lu細(xì)胞、LLC1細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞

GM17219細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞

SUDHL1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞

U-343細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞

1.1B4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LN-18細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞

CMT-93細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Bac1 2F5細(xì)胞、D341MD細(xì)胞、H1105細(xì)胞

H1618細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞

A2008細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞

TM4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞

HCA7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞

SUM-102PT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞

QGP1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞

H1395細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞

GT1-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LY-R細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞、2B4細(xì)胞

LA-N-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞

KYSE-50 Cell|低分化人食管鱗癌細(xì)胞

C643細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞

RCC_7860細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U-2 OS細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞、OLN93細(xì)胞

AtT20細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞

COLO 679細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAOV4細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞

Pfeiffer細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L-Wnt-3A細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞

H929細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：639 V細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、NOK細(xì)胞

H2052細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：K-562細(xì)胞、P560細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞

HepG2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞

A-101D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞

SK-UT-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞

TGW-nu-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hep2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞

3T3NIH細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LX-2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞

M-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEEpiC細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞

Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞

HTori-3.1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BEL-7405細(xì)胞、TEC細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞

211H細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、TO175T細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞

H747細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUD-4細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞

"