"624-mel Cell|人黑色素瘤細胞

細胞背景資料：黑色素瘤；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

H341細胞類似產(chǎn)品：：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞

PECAPJ34細胞類似產(chǎn)品：：BT細胞、NCIH2106細胞、D283 Med細胞

Panc-02細胞類似產(chǎn)品：：UM-UC3細胞、MB231細胞、HTR-8/SV-neo細胞

MDST8細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2286細胞、H1341細胞、VMM5A細胞

B16 F1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-869細胞、PC 12細胞、HTori-3細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

624-mel Cell|人黑色素瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當(dāng)收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

NEC細胞類似產(chǎn)品：：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞

SACC-83細胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞

SW837細胞類似產(chǎn)品：：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞

HPAF-I細胞類似產(chǎn)品：：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NEC細胞類似產(chǎn)品：：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞

SACC-83細胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞

SW837細胞類似產(chǎn)品：：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞

HPAF-I細胞類似產(chǎn)品：：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞傳代比例：對于有限細胞系，傳代時以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細胞密度，計算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對應(yīng)1次倍增，4對應(yīng)2次倍增，8對應(yīng)3次倍增，16對應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達到原來相同的細胞密度。脆弱的或生長緩慢的細胞系通常一傳二，而有活力的，生長快速的細胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細胞系可一傳五十或一傳100。一旦細胞系變?yōu)檫B續(xù)細胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時要保證：細胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時以內(nèi))，可重新進入生長周期；而且在下次傳代前不進人平臺期。

SW-900細胞類似產(chǎn)品：：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞

Sp2/O-Ag14細胞類似產(chǎn)品：：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞

NCIH1385細胞類似產(chǎn)品：：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞

MTC-TT細胞類似產(chǎn)品：：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞

P3X63-Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞

SW403細胞類似產(chǎn)品：：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞

SuDHL 4細胞類似產(chǎn)品：：Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞

OVCA432_Bast細胞類似產(chǎn)品：：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞

HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞

MILE SVEN1細胞類似產(chǎn)品：：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞

624-mel Cell|人黑色素瘤細胞

LICR-HN-6細胞類似產(chǎn)品：：MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞

CA46細胞類似產(chǎn)品：：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞

B6Tert-1細胞類似產(chǎn)品：：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞

P3J HR-1細胞類似產(chǎn)品：：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞

343 MG細胞類似產(chǎn)品：：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞

B10BR細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞

B10BR細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞

HRGEC細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞

GES-1細胞類似產(chǎn)品：：HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞

MB-49細胞類似產(chǎn)品：：HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞

MDA231-LM2-4175細胞類似產(chǎn)品：：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞

H2081細胞類似產(chǎn)品：：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞

Tu 212細胞類似產(chǎn)品：：H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞

QBI-293A細胞類似產(chǎn)品：：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞

HKC細胞類似產(chǎn)品：：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞

CMT 167細胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞

HCT-FET細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞

HCC-1395細胞類似產(chǎn)品：：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞

3T3-L1細胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞

REC細胞類似產(chǎn)品：：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞

RSMC細胞類似產(chǎn)品：：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞

JAR細胞類似產(chǎn)品：：SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞

PTK 2細胞類似產(chǎn)品：：COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞

SNU119細胞類似產(chǎn)品：：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞

RDES細胞類似產(chǎn)品：：RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞

PC-3M-IE8細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞

Metastatic Variant-522細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞

UACC-893細胞類似產(chǎn)品：：HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞

CORL51細胞類似產(chǎn)品：：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞

624-mel Cell|人黑色素瘤細胞

NCI-SNU-878細胞類似產(chǎn)品：：VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞

C22細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞

38C-13細胞類似產(chǎn)品：：MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞

LLC-MK-2細胞類似產(chǎn)品：：A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞

UO31細胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞

ECC-1細胞類似產(chǎn)品：：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞

SU8686細胞類似產(chǎn)品：：BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞類似產(chǎn)品：：GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞

IB-RS-2細胞類似產(chǎn)品：：CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞

OV3121細胞類似產(chǎn)品：：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞

D 407細胞類似產(chǎn)品：：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞

SK BR 03細胞類似產(chǎn)品：：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞

BC-009細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞

PC-12細胞類似產(chǎn)品：：SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞

Keio University-19-19細胞類似產(chǎn)品：：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞

IGR-OV1細胞類似產(chǎn)品：：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞

DMS-153細胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞

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