"Ect1/E6E7 Cell|人宮頸永生化鱗狀細胞

細胞背景資料：宮頸；女性；HPV-１６轉(zhuǎn)化

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

ONS-76細胞類似產(chǎn)品：：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞

HS 1.Tes細胞類似產(chǎn)品：：MCFs細胞、HPB/ALL細胞、D-341細胞

SNU-C1細胞類似產(chǎn)品：：NGP細胞、C1R細胞、SBC-3細胞

3T3L1細胞類似產(chǎn)品：：CATHa細胞、38C13細胞、Caki-2細胞

NCI-HUT-596細胞類似產(chǎn)品：：Hep-G2細胞、CHO-K1細胞、SNU-761細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Ect1/E6E7 Cell|人宮頸永生化鱗狀細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

MDA-MB-231-luc細胞類似產(chǎn)品：：211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞

T-HSC細胞類似產(chǎn)品：：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞

Tu 177細胞類似產(chǎn)品：：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞

LOU-NH-91細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

MDA-MB-231-luc細胞類似產(chǎn)品：：211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞

T-HSC細胞類似產(chǎn)品：：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞

Tu 177細胞類似產(chǎn)品：：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞

LOU-NH-91細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細胞的污染。細菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到，它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因為病毒顆粒別微小，一般的實驗室都沒能力檢查細胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細胞內(nèi)，對整個細胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細胞的實驗結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細胞壁，在細胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時對常用于細胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會影響實驗的結(jié)果。培養(yǎng)多種細胞時操作不當，會導致細胞的交叉污染。由于不同細胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細胞終會完全取代被污染的細胞。

HCC 94細胞類似產(chǎn)品：：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞

LC1sq細胞類似產(chǎn)品：：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞

NCI H508細胞類似產(chǎn)品：：NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞

UCW 100細胞類似產(chǎn)品：：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞

HCC-1937細胞類似產(chǎn)品：：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞

HCC1954細胞類似產(chǎn)品：：MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞

Nb2細胞類似產(chǎn)品：：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞

SCC7細胞類似產(chǎn)品：：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞

NCI-H1672細胞類似產(chǎn)品：：BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞

J774 A1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞

Ect1/E6E7 Cell|人宮頸永生化鱗狀細胞

MV-3細胞類似產(chǎn)品：：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞

TN5B14細胞類似產(chǎn)品：：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

NCI-H295R細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞

SKNMC細胞類似產(chǎn)品：：KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞

H2030細胞類似產(chǎn)品：：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞

H2030細胞類似產(chǎn)品：：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞

HDMEC細胞類似產(chǎn)品：：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞

GI-1細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-10細胞、SW-1088細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞

B-cell with DC Morphology細胞類似產(chǎn)品：：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞

CAKI1細胞類似產(chǎn)品：：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞

PC3-M細胞類似產(chǎn)品：：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞

RIMEC細胞類似產(chǎn)品：：AKR細胞、H-2081細胞、H8細胞

WM 266-4細胞類似產(chǎn)品：：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞

BEL-7404細胞類似產(chǎn)品：：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞

H-441細胞類似產(chǎn)品：：769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞

SU86_86細胞類似產(chǎn)品：：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞

OCI-Ly01細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞

SU-DHL2細胞類似產(chǎn)品：：HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞

CNE-1細胞類似產(chǎn)品：：HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞

GOS3細胞類似產(chǎn)品：：NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞

HCC0095細胞類似產(chǎn)品：：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞

EJ 138細胞類似產(chǎn)品：：IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞

Karpas-299細胞類似產(chǎn)品：：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞

LIXC002細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞

Reuber H-35細胞類似產(chǎn)品：：STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞

ELD-1細胞類似產(chǎn)品：：SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞

OCI/AML-5細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞

KP-N-YN細胞類似產(chǎn)品：：SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞

Ect1/E6E7 Cell|人宮頸永生化鱗狀細胞

NS653細胞類似產(chǎn)品：：H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞

PL12細胞類似產(chǎn)品：：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞

IOSE80UBC細胞類似產(chǎn)品：：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞

DLD 1細胞類似產(chǎn)品：：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞

U 138 MG細胞類似產(chǎn)品：：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞

NCI-HUT-520細胞類似產(chǎn)品：：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞

Pro-5 Lec1.3c細胞類似產(chǎn)品：：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞

S3 HeLa細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞

U138MG細胞類似產(chǎn)品：：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞

HCC-2279細胞類似產(chǎn)品：：HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞

Dami細胞類似產(chǎn)品：：H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞

HLE-B3細胞類似產(chǎn)品：：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞

L-428細胞類似產(chǎn)品：：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞

BLO11細胞類似產(chǎn)品：：H508細胞、H522細胞、C918細胞

K562/ADP細胞類似產(chǎn)品：：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞

NCIH2110細胞類似產(chǎn)品：：CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞

EBNA-293細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞

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