"HCC2185 Cell|人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞

細胞背景資料：轉(zhuǎn)移性小葉乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

Hepa1-6細胞類似產(chǎn)品：：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞

TF-1a細胞類似產(chǎn)品：：Karpas299細胞、786-O細胞、COLO-1細胞

TE-3A細胞類似產(chǎn)品：：COLO 741細胞、TW01細胞、HCC-2218細胞

HuLEC-5a細胞類似產(chǎn)品：：AG06814-M細胞、Karpas 422細胞、Hs 742.T細胞

Y3.AG.1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：HCC2935細胞、H322細胞、Tb 1 Lu細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HCC2185 Cell|人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

COLO 206細胞類似產(chǎn)品：：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞

Panc-3_27細胞類似產(chǎn)品：：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞

MonoMac6細胞類似產(chǎn)品：：DMS53細胞、SUM190細胞、NCI-H810細胞

HCC-827細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

COLO 206細胞類似產(chǎn)品：：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞

Panc-3_27細胞類似產(chǎn)品：：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞

MonoMac6細胞類似產(chǎn)品：：DMS53細胞、SUM190細胞、NCI-H810細胞

HCC-827細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

Anip 973細胞類似產(chǎn)品：：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞

SKG3A細胞類似產(chǎn)品：：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞

H1563細胞類似產(chǎn)品：：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞

HCC0202細胞類似產(chǎn)品：：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞

COLO 320HSR細胞類似產(chǎn)品：：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞

253J-BV細胞類似產(chǎn)品：：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞

NS1-Ag 4/1細胞類似產(chǎn)品：：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞

MIMVEC細胞類似產(chǎn)品：：A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞

U373-MG細胞類似產(chǎn)品：：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞

HEC1-A細胞類似產(chǎn)品：：C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞

HCC2185 Cell|人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞

RMG1細胞類似產(chǎn)品：：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞

CCFSTTG1細胞類似產(chǎn)品：：CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞

OCI-Ly10細胞類似產(chǎn)品：：RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞

IOSE-29細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞

NCTC-3960細胞類似產(chǎn)品：：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞

MHCC97細胞類似產(chǎn)品：：SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞

MHCC97細胞類似產(chǎn)品：：SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞

P3-NS1/1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞

SEG1細胞類似產(chǎn)品：：NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞

SK-N-BE-2細胞類似產(chǎn)品：：ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞

KYSE0030細胞類似產(chǎn)品：：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞

H1876細胞類似產(chǎn)品：：22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞

J774A.1細胞類似產(chǎn)品：：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞

MDAPCa2b細胞類似產(chǎn)品：：TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞

Hs-695-T細胞類似產(chǎn)品：：H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞

F56 [Human neoplasm]細胞類似產(chǎn)品：：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞

H-929細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞

TMK-1細胞類似產(chǎn)品：：MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞

HEK-AD293細胞類似產(chǎn)品：：KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞

NCI-H2405細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞

NOK細胞類似產(chǎn)品：：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞

PANC-08-13細胞類似產(chǎn)品：：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞

UM-UC-14細胞類似產(chǎn)品：：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞

RSC-96細胞類似產(chǎn)品：：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞

TR 146細胞類似產(chǎn)品：：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞

SGC996細胞類似產(chǎn)品：：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞

PANC 813細胞類似產(chǎn)品：：HCT GEO細胞、MESSADX5細胞、PM6細胞

NBL-1細胞類似產(chǎn)品：：LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞

Hs729T細胞類似產(chǎn)品：：NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞

HCC2185 Cell|人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞

NK 10a細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞

ZYM-SVEC01細胞類似產(chǎn)品：：EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞

H2196細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞

GM04154B細胞類似產(chǎn)品：：CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞

SUM-149細胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞

MDAMB330細胞類似產(chǎn)品：：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞

EB-1細胞類似產(chǎn)品：：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞

MDA-MB-175細胞類似產(chǎn)品：：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞

SW626細胞類似產(chǎn)品：：XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞

U-hth74細胞類似產(chǎn)品：：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞

NCI H548細胞類似產(chǎn)品：：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞

KYSE 450細胞類似產(chǎn)品：：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞

HEK293-EBNA細胞類似產(chǎn)品：：Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞

HRPEpiC細胞類似產(chǎn)品：：HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞

Hep G2/C3A細胞類似產(chǎn)品：：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞

H-1651細胞類似產(chǎn)品：：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞

RC-4B/C細胞類似產(chǎn)品：：SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞

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