"BAEC Cell|牛主動脈內(nèi)皮細胞

細胞背景資料：主動脈；內(nèi)皮細胞

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

hRPTC細胞類似產(chǎn)品：：PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞

P3.NS-1/1.Ag4.1細胞類似產(chǎn)品：：BJAB細胞、OV 2008細胞、HRPEpiC細胞

HT 1197細胞類似產(chǎn)品：：RFL 6細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、BEL-7402細胞

R 2 C細胞類似產(chǎn)品：：CCD-841-CoTr細胞、Hs 839.T細胞、H-1385細胞

D407細胞類似產(chǎn)品：：MDA-468細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、JF305細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

BAEC Cell|牛主動脈內(nèi)皮細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

KG-1細胞類似產(chǎn)品：：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞

OVTOKO細胞類似產(chǎn)品：：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞

HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞

HCA7細胞類似產(chǎn)品：：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

KG-1細胞類似產(chǎn)品：：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞

OVTOKO細胞類似產(chǎn)品：：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞

HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞

HCA7細胞類似產(chǎn)品：：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

EVSA/T細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞

1E8-H細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞

K422細胞類似產(chǎn)品：：N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞

SK-RC-42細胞類似產(chǎn)品：：LoMeT-ccRcc細胞、U87細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞

Vero-76細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞

T-47D細胞類似產(chǎn)品：：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞

A2780 CP70細胞類似產(chǎn)品：：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞

PSN1細胞類似產(chǎn)品：：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞

Ramos細胞類似產(chǎn)品：：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞

BAEC Cell|牛主動脈內(nèi)皮細胞

293細胞類似產(chǎn)品：：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞

RS4:11細胞類似產(chǎn)品：：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞

B16-F1細胞類似產(chǎn)品：：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞

MAVER1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞

Jiyoye(P-2003)細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞

Hs683細胞類似產(chǎn)品：：293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞

MCF-7/ADR細胞類似產(chǎn)品：：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞

MZ-CRC-1細胞類似產(chǎn)品：：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞

KMM1細胞類似產(chǎn)品：：RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞

BT-549細胞類似產(chǎn)品：：H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞

RA細胞類似產(chǎn)品：：T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞

HSAS1細胞類似產(chǎn)品：：hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞

ECGI10細胞類似產(chǎn)品：：CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞

DU-145細胞類似產(chǎn)品：：HRGEC細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、Hx-147細胞

OV3121細胞類似產(chǎn)品：：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞

OCI/AML-5細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞

MCA 38細胞類似產(chǎn)品：：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞

HPAF-II細胞類似產(chǎn)品：：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞

NMCG-1細胞類似產(chǎn)品：：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞

MOLT-16細胞類似產(chǎn)品：：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞

SW 982細胞類似產(chǎn)品：：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞

RK13細胞類似產(chǎn)品：：CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞

P3-Jiyoye細胞類似產(chǎn)品：：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞

NW38細胞類似產(chǎn)品：：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞

HMC3細胞類似產(chǎn)品：：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞

JTC-39細胞類似產(chǎn)品：：H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞

CAL-120細胞類似產(chǎn)品：：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞

QGP 1細胞類似產(chǎn)品：：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞

GM02219C細胞類似產(chǎn)品：：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞

BAEC Cell|牛主動脈內(nèi)皮細胞

RWPE2細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞

SCC-15細胞類似產(chǎn)品：：MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞

H1404細胞類似產(chǎn)品：：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞

Chang Cells細胞類似產(chǎn)品：：Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞

H-820細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞

Hs 766.T細胞類似產(chǎn)品：：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞

Hi5細胞類似產(chǎn)品：：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞

SK-N-BE(1)細胞類似產(chǎn)品：：AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞

T-24細胞類似產(chǎn)品：：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞

GM2219C細胞類似產(chǎn)品：：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞

Hela-Ap-1細胞類似產(chǎn)品：：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞

RPMI 8226/S細胞類似產(chǎn)品：：AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞

L(TK-)細胞類似產(chǎn)品：：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞

IOSE 29細胞類似產(chǎn)品：：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞

MonoMac 6細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞

Clone 15 HL-60細胞類似產(chǎn)品：：Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞

GM00637H細胞類似產(chǎn)品：：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞

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