"mIMCD-3 Cell|小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：腎；內(nèi)髓集合管；上皮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿(mǎn)器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

Hs-274-T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞

D-324MED細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SF 539細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞

IPEC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKNBE2C細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、RASMC細(xì)胞

OCI-AML3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC0078細(xì)胞、143TK-細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞

D324 Med細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Vero 76細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

mIMCD-3 Cell|小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周?chē)缓笸ㄟ^(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

mRTEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞

MCF-7/AdrR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞

HOP 62細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞

SW-1088細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

mRTEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞

MCF-7/AdrR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞

HOP 62細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞

SW-1088細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

MDCK-II細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞

BeWo細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞

HeLa.S3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ND7/23細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞

RCC10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞

Wistar Institute-38細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞

Kasumi-6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞

SW 626細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞

OCILY10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞

L428細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞、H82細(xì)胞

NCIH2106細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞

mIMCD-3 Cell|小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞

CCLP1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞

MRC5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞

Ramos細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL51細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞

OCI-LY-18細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞

SK-N-F1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 274.T細(xì)胞、IM-95細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞

NCI-H1568細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞

ARO-81細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞

P3 88 D1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞

ATDC-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞

Hep 3B2_1-7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞

A101D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞

Ls-174-T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞

SUDHL-16細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：F-81細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞

CHP 126細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-23細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞

SVGp12細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2066細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、TE354T細(xì)胞

CO115細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞

KNS-62細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞

RCC-10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞

HCC-95細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞

16-HBEo細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞

H283細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞

Human podocyte細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞

SKN-AS細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞

HCC2279細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞

BLO-11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞

Swiss 3T6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞

MDA231細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞

HepG2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞

LC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PAa細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞

mIMCD-3 Cell|小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞

U-87 MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞

Balb/c 3T3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞

HT-55細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞

NCI-H1954細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE13細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞

NCI-H865細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SU-DHL-6細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞

IPI-2I細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞

CHAGOK1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞

WM-2664細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mahlavu細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞

RPMI #1846細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞

LP-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞

P3X63Ag8653細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞

BEAS-2B細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PA-1細(xì)胞、143TK-細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞

BLO11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞

AZ521細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞

KYSE270細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞

NCI-H128細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞

AN3-CA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UCLA-SO-M20細(xì)胞、GM16136細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞

"