"LA-N-1 Cell|人神經(jīng)母細胞瘤細胞

細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤；骨髓轉(zhuǎn)移；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

QSG7701細胞類似產(chǎn)品：：SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞

HIMEC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-157細胞、HCC-827細胞、50.B1細胞

KM H-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1838細胞、Caov-3細胞、DMS-153細胞

67NR細胞類似產(chǎn)品：：Hs839T細胞、PT-67細胞、NFS60細胞

NCI-H716細胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1.6細胞、MDA-330細胞、Vero from pool #76細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

LA-N-1 Cell|人神經(jīng)母細胞瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做HAO標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

MLE-12細胞類似產(chǎn)品：：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞

NMC-G1細胞類似產(chǎn)品：：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞

J.E6-1細胞類似產(chǎn)品：：JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞

Clone Y1細胞類似產(chǎn)品：：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

MLE-12細胞類似產(chǎn)品：：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞

NMC-G1細胞類似產(chǎn)品：：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞

J.E6-1細胞類似產(chǎn)品：：JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞

Clone Y1細胞類似產(chǎn)品：：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系（cell line）指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。（由此便引申出了后來的有限細胞系（FiniteCellLine）、無限細胞系（InfiniteCellLine）），因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞（定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細胞。腫瘤細胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國際上美、英和日本等國已建有細胞庫；美國已有美國標準細胞庫或細胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細胞庫（HGMR）、細胞衰老細胞庫（CAR）等，其中ATCC不僅是美國也世界大的細胞庫。細胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認可為己鑒定的細胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長期培養(yǎng)，別是反復傳代的細胞，常需做如下說明：組織來源：細胞供體所屬物種，來自人體或者動物；個體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應說明臨床和病理診斷，以及病歷號等。細胞生物學檢測：了解細胞一般和殊的生物學性狀，如細胞一般形態(tài)，異結(jié)構，細胞生長曲線和分裂指數(shù)，倍增時間，接種率等。如為腫瘤細胞，為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。培養(yǎng)條件和方法；應說明細胞系（或株）適應的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。

PK (15)細胞類似產(chǎn)品：：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞

MT4細胞類似產(chǎn)品：：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞

SNU-119細胞類似產(chǎn)品：：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞

B 95.8細胞類似產(chǎn)品：：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞

LIXC002細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞

C12細胞類似產(chǎn)品：：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞

HUCCT1細胞類似產(chǎn)品：：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞

HSAS4細胞類似產(chǎn)品：：A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞

MDA-MB-231 #4175細胞類似產(chǎn)品：：REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞

H1876細胞類似產(chǎn)品：：22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞

LA-N-1 Cell|人神經(jīng)母細胞瘤細胞

Tregs細胞類似產(chǎn)品：：Epstein-Barr-3細胞、SCC9細胞、SKNBE2細胞

D324細胞類似產(chǎn)品：：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞

MKN-74細胞類似產(chǎn)品：：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞

J774 A.1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞

PC 61細胞類似產(chǎn)品：：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞

COLO 738細胞類似產(chǎn)品：：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞

BRL細胞類似產(chǎn)品：：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞

LN382細胞類似產(chǎn)品：：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞

NCI-H1703細胞類似產(chǎn)品：：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞

NU-GC-4細胞類似產(chǎn)品：：TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞

MRC 5細胞類似產(chǎn)品：：BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞

HCT 15細胞類似產(chǎn)品：：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞

U266 Bl細胞類似產(chǎn)品：：H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞

SC細胞類似產(chǎn)品：：DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞

NTERA-2/D1細胞類似產(chǎn)品：：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞

Walker-256-TC細胞類似產(chǎn)品：：CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞

PLA801-95D細胞類似產(chǎn)品：：SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞

293 H細胞類似產(chǎn)品：：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞

Hs746-T細胞類似產(chǎn)品：：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞

EHEB細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞

GLRK 13細胞類似產(chǎn)品：：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞

PC2細胞類似產(chǎn)品：：Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞

L23/P細胞類似產(chǎn)品：：ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞

He-La細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞

H1404細胞類似產(chǎn)品：：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞

PLC-PRF-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞

HEK-A細胞類似產(chǎn)品：：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞

Rat Chondrosarcoma Swarm細胞類似產(chǎn)品：：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞

BMDC細胞類似產(chǎn)品：：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞

LA-N-1 Cell|人神經(jīng)母細胞瘤細胞

SK MEL 28細胞類似產(chǎn)品：：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞

H920細胞類似產(chǎn)品：：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞

KU-812-F細胞類似產(chǎn)品：：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞

HEK293-A細胞類似產(chǎn)品：：UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞

TCC-SUP細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞

CD-18細胞類似產(chǎn)品：：B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞

BT483細胞類似產(chǎn)品：：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞

HOEC細胞類似產(chǎn)品：：HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞

SW-1271細胞類似產(chǎn)品：：HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞

B16-F10--RED細胞類似產(chǎn)品：：3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞

KYSE 520細胞類似產(chǎn)品：：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞

Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞類似產(chǎn)品：：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞

H-23細胞類似產(chǎn)品：：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞

LS174T細胞類似產(chǎn)品：：Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞

IPLB-SF 21AE細胞類似產(chǎn)品：：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞

HKBML細胞類似產(chǎn)品：：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞

H-4-II-E細胞類似產(chǎn)品：：8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞

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