"LIM1215 Cell|人結(jié)直腸癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：結(jié)直腸癌；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

NUGC2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞

Capan1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-RC-20細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、G-361細(xì)胞

WM-239A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KYSE 410細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞

OV-1063細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C127細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞

SU-DHL-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKMEL5細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

LIM1215 Cell|人結(jié)直腸癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周?chē)?，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

FHCRC subclone 11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞

GM03320D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞

PK13細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞

KYSE-450細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MHHCALL2細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

FHCRC subclone 11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞

GM03320D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞

PK13細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞

KYSE-450細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MHHCALL2細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。（由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）、無(wú)限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）），因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞（定環(huán)境下口語(yǔ)和書(shū)面語(yǔ)都使用），廣義是指可傳代的細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類(lèi)上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國(guó)際上美、英和日本等國(guó)已建有細(xì)胞庫(kù)；美國(guó)已有美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫(kù)或細(xì)胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細(xì)胞庫(kù)（HGMR）、細(xì)胞衰老細(xì)胞庫(kù)（CAR）等，其中ATCC不僅是美國(guó)也世界大的細(xì)胞庫(kù)。細(xì)胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認(rèn)可為己鑒定的細(xì)胞，視具體情況而定，無(wú)統(tǒng)一規(guī)定。對(duì)于用作原代培養(yǎng)的細(xì)胞只要供體均一，取材部位及組織種類(lèi)等條件穩(wěn)定即可，如用做長(zhǎng)期培養(yǎng)，別是反復(fù)傳代的細(xì)胞，常需做如下說(shuō)明：組織來(lái)源：細(xì)胞供體所屬物種，來(lái)自人體或者動(dòng)物；個(gè)體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應(yīng)說(shuō)明臨床和病理診斷，以及病歷號(hào)等。細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)：了解細(xì)胞一般和殊的生物學(xué)性狀，如細(xì)胞一般形態(tài)，異結(jié)構(gòu)，細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)和分裂指數(shù)，倍增時(shí)間，接種率等。如為腫瘤細(xì)胞，為說(shuō)明來(lái)源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對(duì)正常組織侵潤(rùn)力等實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)條件和方法；應(yīng)說(shuō)明細(xì)胞系（或株）適應(yīng)的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類(lèi)、用量以及適宜PH值。

UK Pan-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞

LU451細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞

210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞

HLCL9B10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞

Hep 3B2.1-7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDAMB134細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞、BT-325細(xì)胞

HCV29細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞

OKT3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞

UCLA SO M21細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞

Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞

DMS 79細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞

LIM1215 Cell|人結(jié)直腸癌細(xì)胞

NRK 52E細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞

D341 Med細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A172細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞

MRAEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LNCaP C4-2B細(xì)胞、LS-123細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞

TE-6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK MEL 28細(xì)胞、MFC細(xì)胞、REC-1細(xì)胞

MDAMB175VII細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCV-29細(xì)胞、CT-26細(xì)胞、WM451細(xì)胞

Fetal Human Lens-124細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞

Fetal Human Lens-124細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞

Saos2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞

L363細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞

PLC/PRF5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞

JG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SCC9細(xì)胞、High5細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞

DHL-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney細(xì)胞、PL11細(xì)胞、Fu97細(xì)胞

U373 MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞

LIXC002細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞

HCC0827細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞

COLO-829細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞

U-87-MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MFHL-2細(xì)胞、A375細(xì)胞、T98 G細(xì)胞

GDM1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Jurkat-FHCRC細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞

TE-85 clone 5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE6細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、FT-293細(xì)胞

CCRF/CEM-C7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞

MDA-MB-134-VI細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞

Lewis lung carcinoma細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Duck embryo細(xì)胞、293H細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞

MB157細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞

MDA-MB 468細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U373細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞

H1770細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞

QSG-7701細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞

Nb2a細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞

18G3.cl 1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞

CWR22Rv1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞

LIM1215 Cell|人結(jié)直腸癌細(xì)胞

IBRS2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞

ATDC-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞

HR-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞

VMM5A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞

SW962細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞

UMR 106細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞

KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞

HCM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞

Jeko1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞

Ca 9-22細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞

22Rv1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA.MB.231細(xì)胞、GM04680細(xì)胞、UT-7細(xì)胞

CT-26細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞

A549 ATCC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞

H1755細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞

Hs870T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞

SNU638細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR3細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞、AD293細(xì)胞

H1618細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞

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