"CAL-148 Cell|人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

KG-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞

LU-65M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OE19細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、MFE296細(xì)胞

SKGT4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEND細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞、K422細(xì)胞

BT-483細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C8161細(xì)胞、JIII細(xì)胞、M109細(xì)胞

NCI-SNU-601細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CAL-148 Cell|人乳腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

LIM1215細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞

SCC15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞

Vero 76細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞

4T1-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU-812細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

LIM1215細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞

SCC15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞

Vero 76細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞

4T1-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU-812細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

JiyoyeP-2003細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UCLA SO M14細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Panc813細(xì)胞

MNNGHOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞

M-G63細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞

VK-2/E6E7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-445細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞、GLC82細(xì)胞

PC-3M-2B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GBC-SD細(xì)胞、HUT125細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞

OK-WT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞

hTERT-RPE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPA'87細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞、Adeno-293細(xì)胞

LA-N-6(OAN)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mel RM細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞

H1688細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞

Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SSP-25細(xì)胞、H6c7細(xì)胞、HANK細(xì)胞

CAL-148 Cell|人乳腺癌細(xì)胞

NBLS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞

H-2029細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞

SKGIIIA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞

SKNBE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞

HEM-L細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞

Tu 212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞

Tu 212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞

Daudi細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 837細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞

KMY1022細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞

NB-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞

P116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞

A-673細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞

HKBML細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞

Hs852細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FDCP1細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞

FRO81-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞

Mel624細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH847細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞

P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM102PT細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞、RT112細(xì)胞

MDAMB-231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KTCTL140細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞

Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞

KYSE 510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞

FRTL 5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞

HRIF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CV-1細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞

D283-MED細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞

D283-MED細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞

SW839細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞

SNU387細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞

32D:cl3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Farage OL細(xì)胞、LS174細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞

LIM1215細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞

CCLP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞

CAL-148 Cell|人乳腺癌細(xì)胞

3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞

UWB1-289細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP細(xì)胞、HHFK細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞

Rat1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：INS-1細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、SW 780細(xì)胞

SK Mel28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：USMC細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞

ARO-81細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞

HUCCT1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞

CL40細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞

VE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GC-2spd(ts)細(xì)胞、LM3細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞

Mv.1.Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞

MDA-MB157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：hUC-MSC細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞

L363細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞

H1792細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IM9細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞

U 138 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞

CPAE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OSRC2細(xì)胞、LS411細(xì)胞、SW48細(xì)胞

MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞

MDA-MB-468細(xì)胞類似產(chǎn)品：：V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞

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