"SSP-25 Cell|人肝膽管癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：肝內(nèi)膽管癌；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴增(形成細(xì)胞株)，可以進行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。

細(xì)胞生長：貼壁

HUT 28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞

D562細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MIA-PaCa-2細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、hA549細(xì)胞

CCD-841-CoN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DOK細(xì)胞、HTori3細(xì)胞、SW1783細(xì)胞

GL261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02131細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞

Lu-165細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BC-028細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、NRCC細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SSP-25 Cell|人肝膽管癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時，動作要輕，以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

Ca Ski細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、D-407細(xì)胞

H498細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞

GM02131細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞

MES23.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Ca Ski細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、D-407細(xì)胞

H498細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞

GM02131細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞

MES23.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。（由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）、無限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）），因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞（定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國際上美、英和日本等國已建有細(xì)胞庫；美國已有美國標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫或細(xì)胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細(xì)胞庫（HGMR）、細(xì)胞衰老細(xì)胞庫（CAR）等，其中ATCC不僅是美國也世界大的細(xì)胞庫。細(xì)胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認(rèn)可為己鑒定的細(xì)胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細(xì)胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長期培養(yǎng)，別是反復(fù)傳代的細(xì)胞，常需做如下說明：組織來源：細(xì)胞供體所屬物種，來自人體或者動物；個體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應(yīng)說明臨床和病理診斷，以及病歷號等。細(xì)胞生物學(xué)檢測：了解細(xì)胞一般和殊的生物學(xué)性狀，如細(xì)胞一般形態(tài)，異結(jié)構(gòu)，細(xì)胞生長曲線和分裂指數(shù)，倍增時間，接種率等。如為腫瘤細(xì)胞，為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。培養(yǎng)條件和方法；應(yīng)說明細(xì)胞系（或株）適應(yīng)的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。

MOLP-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H157細(xì)胞、H-510A細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞

HCC366細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞

NuTu-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞

H-295細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RDES-1細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞

Panc-8_13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞

F-36P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hepa 1-6細(xì)胞、NB9細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞

Hx147細(xì)胞類似產(chǎn)品：：343 MG細(xì)胞、BJAB細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞

MM-1S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞

IOSE-80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞

H1770細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞

SSP-25 Cell|人肝膽管癌細(xì)胞

KY-50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞

H1238細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞

T-24細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-ML2細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞、BL-6細(xì)胞

HCC-1359細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-159PT細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞

OCI/AML-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞

H-1105細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞

K-1735細(xì)胞類似產(chǎn)品：：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞

LS-513細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞

SJSA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞

CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞

KMM-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞

Farage OL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞

H1693細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞

A10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞

FRO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H441-4細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞、H716細(xì)胞

GBCSD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞

TYK-nu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SEG-1細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞

NB-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞

MDAMB435細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞

MOLT-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL92.1.7細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞、SNU668細(xì)胞

LLC-MK2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞

NCI-H460細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞

SF-539 BT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL1細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞、RMC細(xì)胞

MDA-MB 453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞

NIH:OVCAR-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞

SK-ES-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CD18/HPAF細(xì)胞、GCT細(xì)胞、N87細(xì)胞

HOCF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞

B10BR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞

H-2106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞

SSP-25 Cell|人肝膽管癌細(xì)胞

RPMI-1846細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞

FL-83B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW954細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞、MDA175細(xì)胞

MDA MB231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞

TEV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞

HCS-2/8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 c18細(xì)胞、PVEC細(xì)胞、GM03570細(xì)胞

MPC11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞

D341Med細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞

BDCM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML2細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞

Hs 832(C).T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞

H-740細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞

IPEC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞

H2405細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BALL-1細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞

MMVECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞

LIM-1215細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞

Panc-10.05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA432_Bast細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞、Rat1細(xì)胞

H841細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞

SW-1573細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞

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