"MEC-1 Cell|人粘液表皮樣癌細胞

細胞背景資料：粘液表皮樣癌

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

LICCF細胞類似產(chǎn)品：：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞

PCI-4B細胞類似產(chǎn)品：：GDM-1細胞、HT 1376.T細胞、NCI-H165細胞

NS20-Y細胞類似產(chǎn)品：：F442-A細胞、P3X63-Ag8.653細胞、H.Ep. #2細胞

Lu-99A細胞類似產(chǎn)品：：P3X63 Ag8細胞、P388.D1細胞、BC3 H1細胞

A1847細胞類似產(chǎn)品：：ONS76細胞、HNE-2細胞、CCRF-CEM C7細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MEC-1 Cell|人粘液表皮樣癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

BE(2)M17細胞類似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞

MLMA細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞

COLO320DM細胞類似產(chǎn)品：：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞

R-1059-D細胞類似產(chǎn)品：：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

BE(2)M17細胞類似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞

MLMA細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞

COLO320DM細胞類似產(chǎn)品：：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞

R-1059-D細胞類似產(chǎn)品：：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

AsPC-1細胞類似產(chǎn)品：：MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞

Cor L51細胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞

MDST8細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞

NCIH1623細胞類似產(chǎn)品：：MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞

Michigan Cancer Foundation-12F細胞類似產(chǎn)品：：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞

SCC VII細胞類似產(chǎn)品：：AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞

SUM-149細胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞

XuanWei Lung Cancer-05細胞類似產(chǎn)品：：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞

IMR-32細胞類似產(chǎn)品：：BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞

CT26-clone 25細胞類似產(chǎn)品：：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞

MEC-1 Cell|人粘液表皮樣癌細胞

SKMEL2細胞類似產(chǎn)品：：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞

TGW-nu-1細胞類似產(chǎn)品：：Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞

H2291細胞類似產(chǎn)品：：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞

Japanese Tissue Culture-39細胞類似產(chǎn)品：：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞

NTera 2細胞類似產(chǎn)品：：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞

MUVEC細胞類似產(chǎn)品：：SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞

MUVEC細胞類似產(chǎn)品：：SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞

SMMC 7721細胞類似產(chǎn)品：：EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞

Gerner 7666細胞類似產(chǎn)品：：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞

DSL6A/C1細胞類似產(chǎn)品：：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞

GOS3細胞類似產(chǎn)品：：NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞

Tn 5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞

hTERT RPE1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞

RMS 13細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞

ARO 81-1細胞類似產(chǎn)品：：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞

Caco-2 BBe細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞

Karpas-299細胞類似產(chǎn)品：：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞

GM346細胞類似產(chǎn)品：：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞

NCI-SNU-520細胞類似產(chǎn)品：：SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞

NK-92細胞類似產(chǎn)品：：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞

XWLC-05細胞類似產(chǎn)品：：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞

U-CH1細胞類似產(chǎn)品：：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞

L6細胞類似產(chǎn)品：：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞

Mel-RM細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞

KMY1022細胞類似產(chǎn)品：：OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞

SU-DHL-2細胞類似產(chǎn)品：：KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞

T98-G細胞類似產(chǎn)品：：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞

PLB-985細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞

BEL 7404細胞類似產(chǎn)品：：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞

MEC-1 Cell|人粘液表皮樣癌細胞

NCIH1105細胞類似產(chǎn)品：：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞

SW-962細胞類似產(chǎn)品：：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞

Walker 256細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞

HUT 125細胞類似產(chǎn)品：：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞

3T3-L1細胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞

CEM-T4細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞

HUVEC細胞類似產(chǎn)品：：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞

WM-239A細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞

WM-239A細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞

OVCA 432細胞類似產(chǎn)品：：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞

NCIH1915細胞類似產(chǎn)品：：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞

H2227細胞類似產(chǎn)品：：ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞

Pa17C細胞類似產(chǎn)品：：H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞

SNU-475細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞

H1568細胞類似產(chǎn)品：：MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞

MHCC97H細胞類似產(chǎn)品：：Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞

95D細胞類似產(chǎn)品：：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞

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