"PA317 Cell|逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：胚胎；成纖維細(xì)胞；NIH Swiss

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。

細(xì)胞生長：貼壁

RL-65細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U266S細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、MDA468細(xì)胞

HHUA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U266BL細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、KP-4細(xì)胞

H-719細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caki2細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、HFL1細(xì)胞

NIH-OVCAR-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：251 MG細(xì)胞、P815細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞

HuT-78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NG 108-15細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

PA317 Cell|逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

KBM7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞

Swiss/3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞

RTE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞

NTC-200細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

KBM7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞

Swiss/3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞

RTE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞

NTC-200細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

經(jīng)過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機(jī)的細(xì)胞，稱之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限，則稱之為有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）；已獲無限繁殖能力的細(xì)胞系，稱連續(xù)或無限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）。無限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，可能成為惡性細(xì)胞，因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無限細(xì)胞系有永生性（不死性），但仍保留接觸抑制和無異體接種致死；有的有永生性，異體接種有致瘤性，說明已惡性化。由某一細(xì)胞系分離出來的、在性狀上與原細(xì)胞系不同的細(xì)胞系，稱亞系（Subline）。這是現(xiàn)有細(xì)胞系中多的一類，中國已建細(xì)胞系主要為這類細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。對(duì)已建成的各種細(xì)胞系或細(xì)胞株習(xí)慣上都給以名稱；細(xì)胞的命名無嚴(yán)格統(tǒng)一規(guī)定，大多采用有一定意義縮寫字或代號(hào)表示。但不論什么形式，均不宜太長，以便記憶和了解。

HSC-T6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞

U-251細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞

KE 37細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-4細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞

MAVER1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞

MDA-MB231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF-126細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、TW-039細(xì)胞

NFHIOSE-80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞

CPA47細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞

EOC-20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞

10T1/2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞

Ramos-2G6-4C10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞

PA317 Cell|逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細(xì)胞

NCI-SNU-761細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞

VM-CUB-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞

SNU398細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞

NCIH211細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞

SCLC-21H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞

SK-N-FI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞

SK-N-FI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞

Hs839.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC154細(xì)胞、VMM39細(xì)胞、Becker細(xì)胞

GC-2spd(ts)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞

B95-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE 32.T細(xì)胞、CoC1細(xì)胞、118MG細(xì)胞

AML-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞

NCI-BL2141細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞

Hs 766.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞

BRL-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞

SC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DU145細(xì)胞、HT 115細(xì)胞、H87細(xì)胞

A-172細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞

GTL-16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞

Evsa-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞

Tu-212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞

3T3 clone A31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EC-109細(xì)胞、NB-4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞

NCIH1915細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞

B16/F10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞

H2286細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞

MKN74細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞

NPA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞

CCD-112 CoN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞

B-cell with DC Morphology細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞

SCC4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 201細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞

CAL-78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞

PA317 Cell|逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細(xì)胞

HS578細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAMA-1細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞

Fetal Human Colon細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM04154細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、SR786細(xì)胞

HS-695T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞

Z138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H520細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞

Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞

SN12CPM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞

HEK-293F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞

NCIH378細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞

GM01232細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞

CHP-100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞

HCT/Taxo1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞

Colo205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞

NCI-H358細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞

HCCC9810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞

TE-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV4:11細(xì)胞、CHOS細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞

OVMANA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞

HCC0095細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞

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