"FRhK-4 Cell|恒河猴胚腎細胞

細胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生；雌性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

PT67細胞類似產品：：CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞

U-373 MG細胞類似產品：：L-132細胞、GES-1細胞、MGHU3細胞

D341 Med細胞類似產品：：A172細胞、HOSEpiC細胞、SNU5細胞

HSAS1細胞類似產品：：hEM15A細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、Hep2細胞

VCaP細胞類似產品：：NCI-H1666細胞、LNCaP clone FGC細胞、U-251-MG細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

FRhK-4 Cell|恒河猴胚腎細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

H1395細胞類似產品：：MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞

H-358細胞類似產品：：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞

2B4-L細胞類似產品：：SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞

H2405細胞類似產品：：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

細胞系（cell line）指原代細胞培養(yǎng)物經首次傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。（由此便引申出了后來的有限細胞系（FiniteCellLine）、無限細胞系（InfiniteCellLine）），因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞（定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細胞。腫瘤細胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國際上美、英和日本等國已建有細胞庫；美國已有美國標準細胞庫或細胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細胞庫（HGMR）、細胞衰老細胞庫（CAR）等，其中ATCC不僅是美國也世界大的細胞庫。細胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認可為己鑒定的細胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長期培養(yǎng)，別是反復傳代的細胞，常需做如下說明：組織來源：細胞供體所屬物種，來自人體或者動物；個體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應說明臨床和病理診斷，以及病歷號等。細胞生物學檢測：了解細胞一般和殊的生物學性狀，如細胞一般形態(tài)，異結構，細胞生長曲線和分裂指數(shù)，倍增時間，接種率等。如為腫瘤細胞，為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。培養(yǎng)條件和方法；應說明細胞系（或株）適應的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。

GLC-82細胞類似產品：：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞

2PK3細胞類似產品：：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞

NK-92 MI細胞類似產品：：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞

WiDr細胞類似產品：：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞

Panc 1細胞類似產品：：PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞

CCK81細胞類似產品：：HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞

UPCI:SCC090細胞類似產品：：alpha-TC1.6細胞、HP615細胞、EFM-19細胞

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HT-55細胞類似產品：：BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞

LY細胞類似產品：：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞

FRhK-4 Cell|恒河猴胚腎細胞

HDQ-P1細胞類似產品：：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞

KYSE 450細胞類似產品：：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞

ST 486細胞類似產品：：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞

Mouse Podocyte Clone-5細胞類似產品：：DSL-6A/C1細胞、HCEC-12細胞、U-251細胞

MDA453細胞類似產品：：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞

OV90細胞類似產品：：McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞

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FRhK-4 Cell|恒河猴胚腎細胞

Hs 695T細胞類似產品：：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞

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H.Ep. #2細胞類似產品：：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞

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SW-1271細胞類似產品：：HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞

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