"COLO 684 Cell|人子宮腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

TSCCa細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞

Panc-327細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCEC-12細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、Y 1細(xì)胞

SKO007細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L1210細(xì)胞、675T細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞

RAW2647細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P30/OHK細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞

CWR22R-V1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI 8402細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

COLO 684 Cell|人子宮腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿(mǎn)培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿(mǎn)的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類(lèi)型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞

NEC8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞

UMC-11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞

PC-3M-IE8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞

NEC8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞

UMC-11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞

PC-3M-IE8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類(lèi)，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非常快速的生長(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見(jiàn)的變化，或者通過(guò)顯微鏡觀察就可以看見(jiàn)。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒(méi)能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

Huh 7.5.1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LM(TK-)細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞、UM2細(xì)胞

SK-LU-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-Ly 3細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、211H細(xì)胞

HSF2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞

TALL1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VERO76細(xì)胞、293-H細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞

Hs 636 T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞

SK-SH-SY5Y細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞

NCI-H1693細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞

HEK (AD293)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞

A-172 MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞

MC9細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞

COLO 684 Cell|人子宮腺癌細(xì)胞

A10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞

AHH1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GOTO細(xì)胞、DKMG細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞

Jijoye細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞

MPP 89細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞

NWA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞

MA-782細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞

CAL148細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs895T細(xì)胞、QG-56細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞

HCE-T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞

NS1-Ag 4/1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞

OVCAR433細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞

WiDr-TC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞

OAW42細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞

H4-II-E-C3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mel-624細(xì)胞、CESS細(xì)胞、THEECs細(xì)胞

PANC 203細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE4細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞

YAC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞

PAN 02細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MFM-223細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞

MV522細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞

SCC7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞

MH-S細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞

HB 611細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI #1846細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、H2405細(xì)胞

Chang Cells細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞

Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞

H508細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞

PaTu-8988s細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞

H-2106細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞

OCI-Ly10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RIN-m 14B細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞

Hs683細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞

Granta-519細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RMS13細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞

HCC366細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞

COLO 684 Cell|人子宮腺癌細(xì)胞

GM04679細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞

H-510A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞

3D4/21細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞

RGC-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞

KHYG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Cates 1B細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞、H2172細(xì)胞

MEC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：J 111細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞

RCC23細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞

GM03190細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞

SUDHL-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-SNU-119細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞、COS1細(xì)胞

Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞

HAPI細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞

Clone Y1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞

SW-948細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW 1573細(xì)胞、CL-34細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞

Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞

SUNE1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞

MGECs細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKBR-3細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞

MOLT-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HKBML細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞

"