"AAV-293 Cell|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞

細胞背景資料：我們推薦使用AAV-２９３細胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-２９３源自普遍使用的 HEK２９３細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK２９３細胞是剪切過的腺病毒５型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞。 跟HEK２９３細胞一樣，AAV-２９３細胞反式表達腺病毒E１基因，當共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E１缺失助質(zhì)粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(Zui主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。

細胞生長：貼壁

HSC-T6細胞類似產(chǎn)品：：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞

PLC PRF 5細胞類似產(chǎn)品：：RLE-6TN細胞、SKCO 1細胞、P388.D1細胞

HT3細胞類似產(chǎn)品：：FDC-P1細胞、LNCaP.FGC細胞、HTori:3細胞

RSC-364細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H-128細胞、CV-1細胞、F442-A細胞

0V-1063細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2 cl.D1細胞、UACC-893細胞、KPNRTBM1細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

AAV-293 Cell|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

32D.3細胞類似產(chǎn)品：：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞

Melan-a細胞類似產(chǎn)品：：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞

Ramos-2G6-4C10細胞類似產(chǎn)品：：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞

C32r細胞類似產(chǎn)品：：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞

細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

32D.3細胞類似產(chǎn)品：：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞

Melan-a細胞類似產(chǎn)品：：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞

Ramos-2G6-4C10細胞類似產(chǎn)品：：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞

C32r細胞類似產(chǎn)品：：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞

細胞生長特性：貼壁生長

細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細胞的污染。細菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非常快速的生長。這些污染比較容易觀察到，它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因為病毒顆粒別微小，一般的實驗室都沒能力檢查細胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細胞內(nèi)，對整個細胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細胞的實驗結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細胞壁，在細胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時對常用于細胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會影響實驗的結(jié)果。培養(yǎng)多種細胞時操作不當，會導致細胞的交叉污染。由于不同細胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細胞終會完全取代被污染的細胞。

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞類似產(chǎn)品：：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞

ACHN細胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞

HSC-2細胞類似產(chǎn)品：：Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞

TE671/RD細胞類似產(chǎn)品：：WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞

NCIH1666細胞類似產(chǎn)品：：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞

M20 [Human melanoma]細胞類似產(chǎn)品：：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞

B-95-8細胞類似產(chǎn)品：：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞

3T3-J2細胞類似產(chǎn)品：：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞

HBL1細胞類似產(chǎn)品：：U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞

LL/2細胞類似產(chǎn)品：：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞

AAV-293 Cell|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞

SK-BR-3細胞類似產(chǎn)品：：KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞

Hepa1-6細胞類似產(chǎn)品：：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞

SCC-4細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞

Ramos-2G6-4C10細胞類似產(chǎn)品：：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞

P30 OHK細胞類似產(chǎn)品：：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞

SW 1417細胞類似產(chǎn)品：：OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞

L-363細胞類似產(chǎn)品：：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞

H-650細胞類似產(chǎn)品：：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞

PL11細胞類似產(chǎn)品：：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞

Porcine Kidney-13細胞類似產(chǎn)品：：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞

Wien 133細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞

TCMK1細胞類似產(chǎn)品：：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞

HT1376細胞類似產(chǎn)品：：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞

RAW264細胞類似產(chǎn)品：：TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞

OSRC2細胞類似產(chǎn)品：：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞

H1299細胞類似產(chǎn)品：：C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞

BJA-B-1細胞類似產(chǎn)品：：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞

SO-Rb 50細胞類似產(chǎn)品：：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞

PK(15)細胞類似產(chǎn)品：：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞

ECC12細胞類似產(chǎn)品：：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞

PaCa2細胞類似產(chǎn)品：：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞

MM6細胞類似產(chǎn)品：：Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞

OSC19細胞類似產(chǎn)品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

RBMVEC細胞類似產(chǎn)品：：DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞

HEC-1-B細胞類似產(chǎn)品：：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞

MDA-MB-157細胞類似產(chǎn)品：：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞

SW-1990細胞類似產(chǎn)品：：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞

Pfeiffer細胞類似產(chǎn)品：：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞

CCRF/CEM/0細胞類似產(chǎn)品：：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞

AAV-293 Cell|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞

MDA MB 231細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞

RS4-11細胞類似產(chǎn)品：：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞

CEM-C1細胞類似產(chǎn)品：：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞

D-324MED細胞類似產(chǎn)品：：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞

WC00044細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞

H-157細胞類似產(chǎn)品：：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞

C3H 10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞

DMS-153細胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞

DMS-153細胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞

H-1238細胞類似產(chǎn)品：：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞

HEC-251細胞類似產(chǎn)品：：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞

GM02132C細胞類似產(chǎn)品：：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞

IOSE-Mar細胞類似產(chǎn)品：：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞

CAOV4細胞類似產(chǎn)品：：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞

WM-266-4細胞類似產(chǎn)品：：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞

Leukemia L1210細胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞

H-2029細胞類似產(chǎn)品：：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞

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