"SNG-M Cell|人子宮內膜癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

SNU-739細胞類似產品：：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞

Mink Lung細胞類似產品：：NCI-H1915細胞、OSC-19細胞、32D clone 3細胞

SNU-387細胞類似產品：：H-1395細胞、NUGC-4細胞、SRA 01/04細胞

MKN-74細胞類似產品：：RMS 1598細胞、SaOS細胞、SU-DHL-8細胞

NCI-H28細胞類似產品：：HPAF2細胞、GT39細胞、SU-DHL-6細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SNG-M Cell|人子宮內膜癌細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉移至培養(yǎng)箱內繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做HAO標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉移至液氮中保藏。

TE 85.T細胞類似產品：：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞

SHG44細胞類似產品：：HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞

RIN Cl-5F細胞類似產品：：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞

OVSAHO細胞類似產品：：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調端粒酶或下調端粒酶抑制物的活性)。用含可調節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。

NCI-SNU-1細胞類似產品：：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞

GM03190細胞類似產品：：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞

M-07e細胞類似產品：：KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞

MBMEC細胞類似產品：：CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞

C-Lu-65細胞類似產品：：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞

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786.O細胞類似產品：：NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞

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SkChA1細胞類似產品：：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞

SNG-M Cell|人子宮內膜癌細胞

SJRH 30細胞類似產品：：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞

Hs-852-T細胞類似產品：：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞

F442A細胞類似產品：：TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞

H-187細胞類似產品：：Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞

NCI-H740細胞類似產品：：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞

C4 I細胞類似產品：：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞

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COLO-829細胞類似產品：：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞

CL 1-0細胞類似產品：：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞

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SNG-M Cell|人子宮內膜癌細胞

H841細胞類似產品：：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞

LC-1 sq細胞類似產品：：CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞

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VK2 (E6/E7)細胞類似產品：：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞

Balb/c 3T3細胞類似產品：：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞

CHOK1細胞類似產品：：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞

HFLS-RA細胞類似產品：：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞

BALB/c 3T3 clone A31細胞類似產品：：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞

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HEH2細胞類似產品：：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞

MDAMB435細胞類似產品：：NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞

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CoC1細胞類似產品：：D324細胞、L540細胞、74Int細胞

Capan 1細胞類似產品：：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞

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