"KLE Cell|人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自６４歲子宮內(nèi)膜癌女性患者

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞點(diǎn)說明書，包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞Zui大的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時; 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。

細(xì)胞生長：貼壁

NCI-H1793細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞

NCI-441細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SGC-996細(xì)胞、H-526細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞

Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H128細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞

GC-1spg細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.2細(xì)胞、CNE1細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞

KMS-26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM149-PT細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KLE Cell|人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Hs-343-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞

RA-FLSs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0044細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、L6細(xì)胞

ID8/MOSEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGP1細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞

PG-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 5細(xì)胞、786-O細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，３-４天換液一次

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Hs-343-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞

RA-FLSs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0044細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、L6細(xì)胞

ID8/MOSEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGP1細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞

PG-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 5細(xì)胞、786-O細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

NCIH1563細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞

32D CL3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H87細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞

MCF7-CTRL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞

RBL 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS79細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞

hFOB1.19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞

CTLA4Ig-24細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293-H細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞、A2008細(xì)胞

SW-756細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞

HLE-SRA-01/04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞

MGc80-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞

R D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞

KLE Cell|人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

HBMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞

KATO 3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WTRL1細(xì)胞、L929細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞

HLEB3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞

SK RC 52細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCC-10細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞、H-322細(xì)胞

COR-L26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞

MESSA-DX5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GLC-15細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞

SW 962細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly07細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞

SUSM-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2073細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞、MKN45細(xì)胞

Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞

MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞

SW-756細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞

H1238細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞

Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞

HCA-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞

Douglas Foster-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞

RBL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞

NCIH208細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞

AM38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞

CCLP-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞

MDA MB 134VI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞

SCC-25細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞

RAW2647細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P30/OHK細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞、SNU520細(xì)胞

CORL88細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞

Caco-2/ATCC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞

266 Bl細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03671C細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞

U-226AR1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞

C666-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞

MDA-MB435細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞

ML2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞

KLE Cell|人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

MOLP-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞

MTC-TT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞

SK-N-BE(2C)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLP8細(xì)胞、INS1E細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞

MSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞

OVCAR-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞

hTERT-HME1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-673細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞、NL-20細(xì)胞

HME-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞

Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞

IMCD3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P560細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞

A431/P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞

SW.620細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM-215細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞

RSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞

H735細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞

HCS2/8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞

3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞

NCI-H661細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞

H87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-ATCC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞、RC-2細(xì)胞

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