"HEK293-FT Cell|表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞

細胞背景資料：該細胞穩(wěn)定表達SV４０大T抗原，并且促進最適病毒產(chǎn)物的產(chǎn)生。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

MC-3T3-E1細胞類似產(chǎn)品：：NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞

WiDrTC細胞類似產(chǎn)品：：SNU-251細胞、SNU387細胞、OCI-LY-7細胞

CCD841CoTr細胞類似產(chǎn)品：：A-72細胞、LC2/Ad細胞、SGC-7901細胞

UK Pan-1細胞類似產(chǎn)品：：HPMEC細胞、NMCG1細胞、RC-4B細胞

A2780 CP70細胞類似產(chǎn)品：：WPMY1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、SU-DHL-4細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HEK293-FT Cell|表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

H28細胞類似產(chǎn)品：：H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞

DMS273細胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞

JB6 Cl 30細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞

Lec1細胞類似產(chǎn)品：：ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

H28細胞類似產(chǎn)品：：H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞

DMS273細胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞

JB6 Cl 30細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞

Lec1細胞類似產(chǎn)品：：ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞

細胞生長特性：懸浮生長

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

HELA-GFP細胞類似產(chǎn)品：：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞

HEK-293F細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞

H1184細胞類似產(chǎn)品：：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞

SV40 MES 13細胞類似產(chǎn)品：：DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞

MA-782細胞類似產(chǎn)品：：NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞

KYSE 50細胞類似產(chǎn)品：：HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞

NCI-A549細胞類似產(chǎn)品：：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞

H1355細胞類似產(chǎn)品：：NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞

N1E115細胞類似產(chǎn)品：：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞

MBT-2細胞類似產(chǎn)品：：HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞

HEK293-FT Cell|表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞

Kupffer細胞類似產(chǎn)品：：Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞

HEC-151細胞類似產(chǎn)品：：HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞

MDAMB453細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞

EA. hy 926細胞類似產(chǎn)品：：SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞

RMG-1細胞類似產(chǎn)品：：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞

TOV-112細胞類似產(chǎn)品：：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞

TOV-112細胞類似產(chǎn)品：：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞

CAL39細胞類似產(chǎn)品：：SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞

rRMECs細胞類似產(chǎn)品：：NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞

PC3M-1E8細胞類似產(chǎn)品：：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞

U-138-MG細胞類似產(chǎn)品：：SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞

LS-513細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞

B16/F10細胞類似產(chǎn)品：：Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞

H-358細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞

HA細胞類似產(chǎn)品：：HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞

H1838細胞類似產(chǎn)品：：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞

Ly18細胞類似產(chǎn)品：：NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞

CCRF.CEM細胞類似產(chǎn)品：：OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞

PA317細胞類似產(chǎn)品：：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞

L363細胞類似產(chǎn)品：：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞

SW 954細胞類似產(chǎn)品：：A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞

BCAP37細胞類似產(chǎn)品：：HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞

D283 Med細胞類似產(chǎn)品：：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞

SNU-C1細胞類似產(chǎn)品：：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞

HRGEC細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞類似產(chǎn)品：：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞

KY-270細胞類似產(chǎn)品：：B78細胞、H1688細胞、COV362細胞

SK-N-BE-2細胞類似產(chǎn)品：：ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞

HTR8/SVneo細胞類似產(chǎn)品：：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞

HEK293-FT Cell|表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞

L1210細胞類似產(chǎn)品：：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞

GM05887細胞類似產(chǎn)品：：RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞

GM00637細胞類似產(chǎn)品：：KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞

AZ-521細胞類似產(chǎn)品：：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞

OVCA433_Bast細胞類似產(chǎn)品：：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞

COR-L26細胞類似產(chǎn)品：：EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞

Beta-TC-6細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞

H820細胞類似產(chǎn)品：：CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞

BHK細胞類似產(chǎn)品：：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞

16-HBE14o細胞類似產(chǎn)品：：SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞

CHOK1細胞類似產(chǎn)品：：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞

L1210細胞類似產(chǎn)品：：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞

E6-1細胞類似產(chǎn)品：：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞

B16-BL6細胞類似產(chǎn)品：：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞

JM1細胞類似產(chǎn)品：：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞

HCC-1419細胞類似產(chǎn)品：：Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞

CCD-1095Sk細胞類似產(chǎn)品：：SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞

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