"IMR-32 Cell|人神經(jīng)母細胞瘤細胞

細胞背景資料：該細胞是１９６７年４月由NicholsWW,LeeJ和DwightS建立，來源于一名１３月齡白人男嬰腹部腫塊，臨床診斷為神經(jīng)母細胞瘤，伴有極少部位的類器官樣分化。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

MUTZ1細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞

J82 COT細胞類似產(chǎn)品：：TE-1細胞、SF539細胞、H-647細胞

H441細胞類似產(chǎn)品：：HHL5細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、NP69細胞

HFL 1細胞類似產(chǎn)品：：MIA Paca2細胞、PE/CA-PJ34細胞、NUGC-2細胞

NCI-H87細胞類似產(chǎn)品：：T24細胞、SKRC-20細胞、Rat 2細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

IMR-32 Cell|人神經(jīng)母細胞瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

CV-1細胞類似產(chǎn)品：：CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞

HFE-145細胞類似產(chǎn)品：：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞

SUM-149細胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞

RSC 96細胞類似產(chǎn)品：：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

CV-1細胞類似產(chǎn)品：：CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞

HFE-145細胞類似產(chǎn)品：：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞

SUM-149細胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞

RSC 96細胞類似產(chǎn)品：：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞

細胞生長特性：貼壁生長

細胞傳代比例：對于有限細胞系，傳代時以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細胞密度，計算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對應1次倍增，4對應2次倍增，8對應3次倍增，16對應4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達到原來相同的細胞密度。脆弱的或生長緩慢的細胞系通常一傳二，而有活力的，生長快速的細胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細胞系可一傳五十或一傳100。一旦細胞系變?yōu)檫B續(xù)細胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時要保證：細胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時以內(nèi))，可重新進入生長周期；而且在下次傳代前不進人平臺期。

CAL 27細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞

MDAMB435細胞類似產(chǎn)品：：NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞

MH-S細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞

UPCI-SCC-90細胞類似產(chǎn)品：：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞

GM03569D細胞類似產(chǎn)品：：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞

Pt K2細胞類似產(chǎn)品：：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞

CCLP-1細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞

T98細胞類似產(chǎn)品：：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞

NCI-HUT-596細胞類似產(chǎn)品：：675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞

BV173細胞類似產(chǎn)品：：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞

IMR-32 Cell|人神經(jīng)母細胞瘤細胞

H-1819細胞類似產(chǎn)品：：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞

751細胞類似產(chǎn)品：：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞

A 549細胞類似產(chǎn)品：：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞

NCI-H660細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞

SF-767細胞類似產(chǎn)品：：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞

NIH:OVCAR4細胞類似產(chǎn)品：：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞

T-47-D細胞類似產(chǎn)品：：BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞

GM05372細胞類似產(chǎn)品：：J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞

MC 116細胞類似產(chǎn)品：：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞

P3J-HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞

HIT.T15細胞類似產(chǎn)品：：M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞

GM02131A細胞類似產(chǎn)品：：B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞

U251-MG細胞類似產(chǎn)品：：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞

526mel細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞

C3H10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞

NCIH378細胞類似產(chǎn)品：：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞

FaDu細胞類似產(chǎn)品：：Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞

NCI-H78細胞類似產(chǎn)品：：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞

AC16 [Human hybrid]細胞類似產(chǎn)品：：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞

COLO320HSR細胞類似產(chǎn)品：：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞

C-26細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞

HCCC-9810細胞類似產(chǎn)品：：ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞

KYSE 510細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞

Ramos G6.C10細胞類似產(chǎn)品：：SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞

BCaP-37細胞類似產(chǎn)品：：HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞

MAD109細胞類似產(chǎn)品：：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞

Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞類似產(chǎn)品：：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞

BHT-101細胞類似產(chǎn)品：：MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞

SupB15W細胞類似產(chǎn)品：：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞

IMR-32 Cell|人神經(jīng)母細胞瘤細胞

HEK 293T/17細胞類似產(chǎn)品：：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞

3T3細胞類似產(chǎn)品：：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞

H661細胞類似產(chǎn)品：：ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞

MADB106細胞類似產(chǎn)品：：JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞

SK-N-BE-2c細胞類似產(chǎn)品：：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞

University of Arizona Cell Culture-812細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞

SCH細胞類似產(chǎn)品：：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞

Experimental Mammary Tumour-6細胞類似產(chǎn)品：：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞

MV 4;11細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞

NCIH2171細胞類似產(chǎn)品：：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞

MJ細胞類似產(chǎn)品：：RN細胞、NCI-SNU-119細胞、Jurkat-FHCRC細胞

HCC1428細胞類似產(chǎn)品：：P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞

HCT8細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞

MC38細胞類似產(chǎn)品：：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞

SK-MES細胞類似產(chǎn)品：：624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞

NCIH647細胞類似產(chǎn)品：：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞

KM932細胞類似產(chǎn)品：：T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞

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