"BxPC-3 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原位胰腺腺癌細胞

細胞背景資料：這個細胞株不表達囊腫性纖維化跨膜電導調節(jié)子(CFTR)。CFTR陽性的細胞株是Capan-１(ATCCHTB-７９)。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。

細胞生長：貼壁

RMS1598細胞類似產品：：NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞

NCI-H847細胞類似產品：：Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞

Lu-65細胞類似產品：：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞

CV 1細胞類似產品：：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞

Hs-343-T細胞類似產品：：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞

BxPC-3 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原位胰腺腺癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

細胞傳代方法：消化５-１０分鐘。１：２。３天內可長滿。

LA 4細胞類似產品：：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞

BC-PAP細胞類似產品：：NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞

PG-4細胞類似產品：：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞

EBTr (NBL-4)細胞類似產品：：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞

HCC0078細胞類似產品：：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

BxPC-3 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原位胰腺腺癌細胞

細胞生長特性：貼壁生長

GC-1spg細胞類似產品：：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞

B16-F10-BL6細胞類似產品：：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞

CaSki細胞類似產品：：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞

LWnt3A細胞類似產品：：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞

LLC-WRC 256細胞類似產品：：HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞

Ha Fe細胞類似產品：：HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞

常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或GAO過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過GAO則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。

細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化，因而細胞失去原有的遺傳性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前，細胞凍存Zui常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增GAO，pH值改變，部分蛋白質由于上述原因而變性，引起細胞內部空間結構紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內結構成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分，減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提GAO細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外，減少胞內形成冰結晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。

H2107細胞類似產品：：38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞

SHI1細胞類似產品：：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞

ketr 3細胞類似產品：：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞

SKHEP1細胞類似產品：：Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞

SF-539 BT細胞類似產品：：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞

Hs688(A)T細胞類似產品：：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞

H2195細胞類似產品：：NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞

SU-DHL-10細胞類似產品：：BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞

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MARC145細胞類似產品：：FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞

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MAVER1細胞類似產品：：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞

WM35細胞類似產品：：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞

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BE(2)-C細胞類似產品：：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞

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Mo 59J細胞類似產品：：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞

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NCI-SNU-C2A細胞類似產品：：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞

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McArdle RH-7777細胞類似產品：：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞

CMEC/D3細胞類似產品：：DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞

C33細胞類似產品：：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞

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PA1細胞類似產品：：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞

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BT483細胞類似產品：：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞

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BxPC-3 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原位胰腺腺癌細胞

Psi-2-DAP細胞類似產品：：EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞

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