"A-875 Cells(贈送Str鑒定報告)|人黑色素瘤細胞
細胞背景資料:NGF受體陽性。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不HAO,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞生長:貼壁
NTERA2D1細胞類似產品::MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
BC-PAP細胞類似產品::NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞
HCA7細胞類似產品::CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
293T細胞類似產品::CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
ZYM-SVEC01細胞類似產品::EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
A-875 Cells(贈送Str鑒定報告)|人黑色素瘤細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水(應每周更換),待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。
細胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。
MC-26細胞類似產品::HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞
NCI-H1568細胞類似產品::MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
D324細胞類似產品::IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
WI38細胞類似產品::NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
BV2細胞類似產品::KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
A-875 Cells(贈送Str鑒定報告)|人黑色素瘤細胞
細胞生長特性:貼壁生長
OCI-Ly 8細胞類似產品::K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
Walker256-TC細胞類似產品::WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
SUP-T1細胞類似產品::N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
COLO680N細胞類似產品::CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
NE1-E6E7細胞類似產品::SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞
KS-1 [Human glioblastoma]細胞類似產品::BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞
培養(yǎng)細胞真的不難,Zui關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越HAO。另外,要掌握HAO胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,Zui近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做HAO支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候ZuiHAO給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性Zui強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不HAO的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
H128細胞類似產品::Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
GM03569D細胞類似產品::MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
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H9c2 (2-1)細胞類似產品::HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
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H184A1細胞類似產品::28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
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Panc2.03細胞類似產品::AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
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C3H10T1/2CL8細胞類似產品::SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
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HUASMC細胞類似產品::HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
Hs578Bst細胞類似產品::RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
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MPC-11細胞類似產品::U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞
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關鍵字: A-875 Cells(贈送Str鑒定報;DSMZ細胞株;ATCC細胞系;RCB細胞;ECACC細胞庫;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。