"LX-2 Cell|人肝星形細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

H322T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞

Hs695細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB4細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、N-9細(xì)胞

H4IIEC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞

H-716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞

SK Mel28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VE細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

LX-2 Cell|人肝星形細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

hTERT RPE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞

RPVSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞

Alexander細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、95D細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞

MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

hTERT RPE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞

RPVSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞

Alexander細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、95D細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞

MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見(jiàn)的變化，或者通過(guò)顯微鏡觀察就可以看見(jiàn)。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒(méi)能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

U-138-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-GT-2細(xì)胞、HNSC細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞

CAL 148細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞

NK-10A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞

AG06814-N細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-838細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞、TE8細(xì)胞

HuH-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞

SUM 149PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3-LL細(xì)胞、SHEE細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞

HemECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Beta-TC-6細(xì)胞、H-1184細(xì)胞、COS-7細(xì)胞

NCI747細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞

UMUC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞

H1781細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAC1細(xì)胞、mREC細(xì)胞、HEC151細(xì)胞

LX-2 Cell|人肝星形細(xì)胞

NCIH526細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞

NIH 3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞

SW-527細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293E細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞

Ketr3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞

DoTc2-4510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞

HLE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞

Y 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MESSA/Dx5細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞

Eca 109細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞

LS 1034細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、LY細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞

AG06814-N細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-838細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞、TE8細(xì)胞

G401細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞

3T3-442A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞

LYR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL6細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、HSC6細(xì)胞

GM02132C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞

SO-RB50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞

3T3-L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞

SUM 52PE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞

GM03571細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞

NBL-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞

CCD1095Sk細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H711細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞、MM134細(xì)胞

Ku812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞

CEM/C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2106細(xì)胞、DH-82細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞

MDAMB175VII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCV-29細(xì)胞、CT-26細(xì)胞、WM451細(xì)胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞

SW 948細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MGc80-3細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞

A427細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 841 CoN細(xì)胞、SW 954細(xì)胞、RH-35細(xì)胞

ISHI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF17細(xì)胞、MC-26細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞

OVCAR-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞

22Rv-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞

LX-2 Cell|人肝星形細(xì)胞

HT-29/CX-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：231-luc細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞、HL60細(xì)胞

MDA-MB 468細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U373細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞

MARC 145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞

H1404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞

GM-346細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVHM細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞、NBLS細(xì)胞

Jijoye細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞

102PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞

OCI-LY-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞

MCF7/WT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞

HANK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞

McArdle RH-7777細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞

HEK293F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞

PL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞

MDAPCa2b細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞

A2780-CP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578.T細(xì)胞、NG10815細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞

VP303細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞

Panc_08_13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞

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