"MHCC97-L Cell|低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：來源于中山醫(yī)院，生長較緩慢

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站YOU勢所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。

細(xì)胞生長：貼壁

HuP-T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞

Calu6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ra #1細(xì)胞、H-23細(xì)胞、PC3M細(xì)胞

AR4IP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D341 Med細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞

ARO81細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SN12C細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞

OCIAML2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-388D1細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、HMSC細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MHCC97-L Cell|低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

KHYG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞

Tb 1 Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞

RPMI no. 8226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞

LSC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

KHYG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞

Tb 1 Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞

RPMI no. 8226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞

LSC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

Cloudman M3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞

NCIH82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT55細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞

TE-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat clone A3細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞、NRK細(xì)胞

VK2/E6E7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ESC細(xì)胞、H660細(xì)胞、C17細(xì)胞

MARC 145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞

WiDr細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞

H1105細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHP 126細(xì)胞、SW579細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞

SHZ-88細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PF382細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞

A2008細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞

253J細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM3569細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、RT4P細(xì)胞

MHCC97-L Cell|低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

FDCP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞

CNE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞

SUDHL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MX-1細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞、SKml2細(xì)胞

H-2122細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞

SNU398細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞

C3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞

C3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞

KYSE510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞

CCD-33Co細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞

190PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞

IPLB-SF 21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HITT15細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞

RCC10 RGB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞

TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 274細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞

J45.01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞

HSC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞

HuTu-80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞

U-CH1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞

B16-F1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞

LU451細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞

Caco-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞

NW-MEL-38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LL/2(LLc1)細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞

L-02細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞

OSKM-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞

OCI-AML5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JURKAT E-6.1細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞

OVCA8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞

OCI-Ly01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞

OCI-Ly03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L929細(xì)胞、A-253細(xì)胞、MC/9細(xì)胞

HSC6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOP 92細(xì)胞、Dami細(xì)胞、SNU620細(xì)胞

MHCC97-L Cell|低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

RPMI7951細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞

H-322細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LOU-NH91細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞、KLM1細(xì)胞

CEK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞

NU-GC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MGC803細(xì)胞、ACCM細(xì)胞、MC 116細(xì)胞

NCI-H157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞

2780CP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞

D324細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IMR32細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞

SW 954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞

Jeko1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞

MIA PaCa-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞

H446細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞

LS123細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞

TE 85.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞

U138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞

MFE296細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞

Colo320細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞

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