"PC-9 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞接收操作說明：請仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(Zui主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細(xì)胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴(yán)重的，會導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

細(xì)胞生長：貼壁

U87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC1005細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、RCM1細(xì)胞

EB-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 1783細(xì)胞、H2405細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞

A7r5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKCol1細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞、ST細(xì)胞

Ha Fe細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1008細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞

Hep-G2/C3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CFSC-8B細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

PC-9 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機(jī)會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時，動作要輕，以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

OKa-C-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞

3T3(A31)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞

HT3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞

PK136細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

OKa-C-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞

3T3(A31)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞

HT3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞

PK136細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

CAKI1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞

HCC1428細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-388細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞

Danio rerio Gill細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKG-3a細(xì)胞、343MG細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞

PA317細(xì)胞類似產(chǎn)品：：R 2 C細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞、H3396細(xì)胞

COS7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞

Hs832T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞

HCC1806細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA420細(xì)胞、GM03569細(xì)胞、COV-434細(xì)胞

KHYG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Cates 1B細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞、H2172細(xì)胞

BRL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞

32D:cl3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Farage OL細(xì)胞、LS174細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞

PC-9 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

NT2-D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞

ssMCF7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mc Coy細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞

J82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞

HCC1954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFE280細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞、SKO3細(xì)胞

X63-Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LU451細(xì)胞、H-196細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞

CWR22Rv1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞

CWR22Rv1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞

231-luc細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞

A253細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞

C4-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE80UBC細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞

MCMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞

HEK;293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞

HEK 293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞

CSQT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞

TALL 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞

T/G HA-VSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞

K562/ADP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞

HNE-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞

C22 (Clara)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFM-192C細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞

MS-751細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞

MDA-MB-175VII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞

A9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1688細(xì)胞、H-1573細(xì)胞、A-10細(xì)胞

CEM-C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞

AML 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞

COLO 320 HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞

Psi2 DAP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞

V-79-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞

DH 82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A549/DDP細(xì)胞、MEG01細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞

PC-9 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

H-1836細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞

NCI-H1563細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞

OCI-Ly 19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞

TE-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞

Ca-Ski細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞

HOC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞

PATU-S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞

CHO-S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞

C6661細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLP-8細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞、NS1細(xì)胞

MX1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞

JTC-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞

T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞

NCI-H1882細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOPC細(xì)胞、SEM細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞

MDCK-II細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞

SK-GT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞

Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IGR-OV1細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞

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