"HuH-6 Cell|人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：肝癌。據(jù)說產(chǎn)球蛋白和甲胎蛋白。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

HOP-62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞

EU-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FUOV1細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞

KYSE-30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：95-D細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、K1735細(xì)胞

Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NRCC細(xì)胞、108CC15細(xì)胞、PF382細(xì)胞

OVCAR-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-Lu-65細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HuH-6 Cell|人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

3D4/21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞

Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞

SK 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Colo-206F細(xì)胞、SW 756細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞

B-cell with DC Morphology細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。６-７天長(zhǎng)滿。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

3D4/21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞

Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞

SK 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Colo-206F細(xì)胞、SW 756細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞

B-cell with DC Morphology細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

RK-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CALU 1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞

NCIH1781細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jijoye細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞

SNU739細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF-PAC1細(xì)胞、149 PT細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞

SU-DHL-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞

Panc04.03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NK92細(xì)胞、NF639細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞

H-2227細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞

JM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MG-HU-3細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞

SNU-387細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1395細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞

CHP-100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞

HOSEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞

HuH-6 Cell|人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞

U-2 OS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL 1-0細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞

Colo16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞

ROS1728細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞

MA-782細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞

373MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：624 MEL細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞、HMEL細(xì)胞

Duke University 145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞

Duke University 145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞

SW-620細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞

PFSK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞

Cloudman M3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞

H647細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞

HEK-293 c18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞

IOSE-Van細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞

AR4-2J細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞

PC12(高分化)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞

P30OHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞

Ls-174-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞

OB2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞

QBC939細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HRA-19細(xì)胞、TE9細(xì)胞、C518細(xì)胞

PLA801D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P388-D1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞

C4-2B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞

CL 1-0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞

L132細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞

NCIH244細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LIPF155C細(xì)胞、MF2059細(xì)胞、EJ細(xì)胞

KNS-62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞

CEMC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞

SuDHL 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞

Ca759細(xì)胞類似產(chǎn)品：：130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞

HuH-6 Cell|人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞

SNK-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞

MDCK II細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SC1細(xì)胞、G-292細(xì)胞、130 T細(xì)胞

Anip[973]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞

CHO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞

H847細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞

NCIH660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞

143B TK-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03571細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞

AtT 20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞

AtT 20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞

SNU1040細(xì)胞類似產(chǎn)品：：16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞

UM-UC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞

SupB15W細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞

rUCMSCs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK.EBNA細(xì)胞、SB細(xì)胞、ME16C細(xì)胞

MNNG/HOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞

MKN-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞

H322T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞

MRASMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞

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