"SW480 Cell|人結(jié)腸癌細胞

細胞背景資料：SW４８０源自一位５１歲白人男性患者的原位直腸腺癌，而SW６２０源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。該細胞CSAp和直腸抗原３陰性；角蛋白陽性；p５３基因第２７３位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，３０９位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代；細胞p５３蛋白表達水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性；未檢測到癌基因N-myc的表達；不表達Matrilysin（一種與腫瘤侵襲相關(guān)的金屬蛋白酶）。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

MDA-MB453細胞類似產(chǎn)品：：CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞

RAOEC細胞類似產(chǎn)品：：KNS62細胞、RMS 13細胞、LN229細胞

CAL-148細胞類似產(chǎn)品：：253J-Bladder-V細胞、Soleus clone 8細胞、ECC-10細胞

WM115mel細胞類似產(chǎn)品：：Panc203細胞、DLD 1細胞、HEP3B2細胞

H295R-S1細胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN 1細胞、GM02219C細胞、HCC202細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SW480 Cell|人結(jié)腸癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

HCEC細胞類似產(chǎn)品：：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞

Ly3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞

B95.8細胞類似產(chǎn)品：：BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞

HCT/Taxo1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞

細胞傳代方法：１：２傳代，１-２天換液一次

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HCEC細胞類似產(chǎn)品：：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞

Ly3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞

B95.8細胞類似產(chǎn)品：：BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞

HCT/Taxo1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞

細胞生長特性：貼壁生長

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

CMT 64細胞類似產(chǎn)品：：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞

HHFK細胞類似產(chǎn)品：：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞

SK-MEL 28細胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞

HOS (TE85)細胞類似產(chǎn)品：：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞

6-10B細胞類似產(chǎn)品：：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞

SK-GT-4細胞類似產(chǎn)品：：6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞

H719細胞類似產(chǎn)品：：CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞

H-2107細胞類似產(chǎn)品：：rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞

OVCAR 420細胞類似產(chǎn)品：：Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞

BSC-40細胞類似產(chǎn)品：：MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞

SW480 Cell|人結(jié)腸癌細胞

J774A1細胞類似產(chǎn)品：：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞

VMCUB1細胞類似產(chǎn)品：：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞

NCTC-3960細胞類似產(chǎn)品：：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞

293-FT細胞類似產(chǎn)品：：P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞

PF-382細胞類似產(chǎn)品：：HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞

FRTL5細胞類似產(chǎn)品：：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞

ECC 10細胞類似產(chǎn)品：：LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞

NCIH1436細胞類似產(chǎn)品：：RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞

NTera2/D1細胞類似產(chǎn)品：：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞

HS-766T細胞類似產(chǎn)品：：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞

DV90細胞類似產(chǎn)品：：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞

LK 2細胞類似產(chǎn)品：：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞

MPP-89細胞類似產(chǎn)品：：Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞

OCIAML4細胞類似產(chǎn)品：：NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞

GOS-3細胞類似產(chǎn)品：：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞

Hs 832(C).T細胞類似產(chǎn)品：：H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞

NCI-SNU-878細胞類似產(chǎn)品：：VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞

LAD 2細胞類似產(chǎn)品：：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞

HSF2細胞類似產(chǎn)品：：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞

ATC241細胞類似產(chǎn)品：：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞

EBNA293細胞類似產(chǎn)品：：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞

HFF-1細胞類似產(chǎn)品：：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞

UCLA NPA871細胞類似產(chǎn)品：：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞

C518細胞類似產(chǎn)品：：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞

GLC82細胞類似產(chǎn)品：：NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞

H-1437細胞類似產(chǎn)品：：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞

HuT 102細胞類似產(chǎn)品：：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞

HS-5細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞

MC3T3-L1細胞類似產(chǎn)品：：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞

SW480 Cell|人結(jié)腸癌細胞

UM-UC-1細胞類似產(chǎn)品：：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞

MDCKII-WT細胞類似產(chǎn)品：：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞

P30-OHK細胞類似產(chǎn)品：：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞類似產(chǎn)品：：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞

OCI/AML-5細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞

H676B細胞類似產(chǎn)品：：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞

C38細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞

NCI-H2195細胞類似產(chǎn)品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞

Sf21細胞類似產(chǎn)品：：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞

NHLF細胞類似產(chǎn)品：：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞

A3細胞類似產(chǎn)品：：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞

Detroit 562細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞

C8-D1A細胞類似產(chǎn)品：：MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞

SNU1細胞類似產(chǎn)品：：K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞

EM-3細胞類似產(chǎn)品：：WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞

SW-780細胞類似產(chǎn)品：：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞

HPMEC細胞類似產(chǎn)品：：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞

"