"CNE-2 Cell|人鼻咽癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：１９８３年由谷淑燕、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鱗癌組織；原代細(xì)胞胰蛋白酶消化，４８小時開始生長，首次傳代２０天。裸鼠體內(nèi)移植１００%成瘤。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。

細(xì)胞生長：貼壁

HEK/EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞

HCC-1171細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-10A細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、7860細(xì)胞

Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9c2 (2-1)細(xì)胞、ES-2細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞

FHCRC subclone 11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞

SK UT 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SaOS-2細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CNE-2 Cell|人鼻咽癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺，以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。

BV2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞

7404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞

C-33-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞

MDST8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

BV2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞

7404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞

C-33-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞

MDST8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非常快速的生長。這些污染比較容易觀察到，它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對整個細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時對常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時操作不當(dāng)，會導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細(xì)胞終會完全取代被污染的細(xì)胞。

NCI-N87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞

Human ErythroLeukemia細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞

NCI-SNU-761細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞

NE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞

MCMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞

NCI-H647細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞

MLOY4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞

LL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞

MDAMB435S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞

EFM-192B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞

CNE-2 Cell|人鼻咽癌細(xì)胞

Panc-1-P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞

Swiss3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞

COV 434細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK/EBNA細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞、HT1197細(xì)胞

H2198細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Malme3M細(xì)胞、NK10a細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞

Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EM3細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞

LAPC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞

LAPC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞

TE-85細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞

MM134細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞

rRMECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞

HT1376細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞

MDA361細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞

P3-X63Ag8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC 2185細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞、H460細(xì)胞

Panc4.03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞

hESC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCAP37細(xì)胞、TE12細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞

SCLC-21H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞

AsPC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞

ESC-410細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOS-143B細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞

PA-TU-8988S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞

Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞

KG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞

RPMI 1788細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞

HUTU80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞

HUTU80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞

H1793細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞

HS-445細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC.3細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞

Karpas422細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞

MES-SA-Dx5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞

GM03571細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞

CNE-2 Cell|人鼻咽癌細(xì)胞

HCC95細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞

H-2030細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞

HBVSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-27細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞

HEB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞

HCC-1187細(xì)胞類似產(chǎn)品：：High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞

NPA'87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞

Hs-852-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞

NCI-HUT-292細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞

HCASMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞

MCA 38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞

P3X63 Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞

CAL 51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞

CEMO-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞

HuH 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞

hOMF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞

FHCRC-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞

NCI-BL1339細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞

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