"JOSK-M Cell|人急性單核細胞白血病細胞

細胞背景資料：急性單核細胞白血病；男性

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

細胞生長：懸浮

NBL-S細胞類似產(chǎn)品：：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞

293S細胞類似產(chǎn)品：：CL-34細胞、H-2172細胞、NCI-H2023細胞

ABC1細胞類似產(chǎn)品：：Hs-852-T細胞、BT483細胞、WEHI 164 TC細胞

Roswell Park Memorial Institute 2650細胞類似產(chǎn)品：：LPC-H12細胞、NCIH1838細胞、Caco-2/ATCC細胞

NCIH2591細胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細胞、Opossum Kidney細胞、HSMC細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

JOSK-M Cell|人急性單核細胞白血病細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

DiFi細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞

HTR8/SVneo細胞類似產(chǎn)品：：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞

H-810細胞類似產(chǎn)品：：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞

COLO 741細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

DiFi細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞

HTR8/SVneo細胞類似產(chǎn)品：：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞

H-810細胞類似產(chǎn)品：：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞

COLO 741細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞

細胞生長特性：懸浮

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

SJCRH30細胞類似產(chǎn)品：：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞

Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞類似產(chǎn)品：：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞

SKMES細胞類似產(chǎn)品：：THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞

CAMA1細胞類似產(chǎn)品：：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞

D283-MED細胞類似產(chǎn)品：：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞

32D.3細胞類似產(chǎn)品：：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞

OCI-LY-8細胞類似產(chǎn)品：：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞

4T1.2細胞類似產(chǎn)品：：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞

Calu-1細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞

NBLAN5T細胞類似產(chǎn)品：：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞

JOSK-M Cell|人急性單核細胞白血病細胞

Hs 839.T細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞

P3 NS1 Ag4/1細胞類似產(chǎn)品：：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞

KYSE510細胞類似產(chǎn)品：：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞

SW1353細胞類似產(chǎn)品：：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞

HT 1080.T細胞類似產(chǎn)品：：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞

253J-Bladder-V細胞類似產(chǎn)品：：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞

253J-Bladder-V細胞類似產(chǎn)品：：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞

HNE-2細胞類似產(chǎn)品：：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞

ACC-M細胞類似產(chǎn)品：：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞

KLN205細胞類似產(chǎn)品：：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞

CEM-C7細胞類似產(chǎn)品：：CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞

NCIH1734細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞

BC-3-H-I細胞類似產(chǎn)品：：CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞

K 562細胞類似產(chǎn)品：：Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞

CCD-841-CoN細胞類似產(chǎn)品：：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞

H1819細胞類似產(chǎn)品：：HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞

TSUpr1細胞類似產(chǎn)品：：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞

HSC6細胞類似產(chǎn)品：：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞

FBHE細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞

H-865細胞類似產(chǎn)品：：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞

A-172細胞類似產(chǎn)品：：SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞

HEK293FT細胞類似產(chǎn)品：：U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞

H2172細胞類似產(chǎn)品：：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞

H2172細胞類似產(chǎn)品：：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞

H1651細胞類似產(chǎn)品：：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞

Tokyo Medical and Dental university 8細胞類似產(chǎn)品：：CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞

LC-1Sq細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞

BEL7404細胞類似產(chǎn)品：：Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞

COR-L23細胞類似產(chǎn)品：：CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞

JOSK-M Cell|人急性單核細胞白血病細胞

ARO細胞類似產(chǎn)品：：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞

RPE1-hTERT細胞類似產(chǎn)品：：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞

GC1-SPG細胞類似產(chǎn)品：：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞

32D.cl3細胞類似產(chǎn)品：：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞

NCI-SNU-878細胞類似產(chǎn)品：：VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞

LLCPK1細胞類似產(chǎn)品：：SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞

AML-193細胞類似產(chǎn)品：：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞

EB-2細胞類似產(chǎn)品：：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞

MDA-1386細胞類似產(chǎn)品：：786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞

hTERT-HME1細胞類似產(chǎn)品：：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞

CCD19Lu細胞類似產(chǎn)品：：Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞

COLO 699細胞類似產(chǎn)品：：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞

AE1201細胞類似產(chǎn)品：：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞

Michigan Cancer Foundation-12A細胞類似產(chǎn)品：：NBL-12細胞、HSC/mHSC細胞、CAL27細胞

DMS 79細胞類似產(chǎn)品：：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞

EVSA/T細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞

M-NFS-60細胞類似產(chǎn)品：：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞

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