熒光染料的優(yōu)點：
使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。
總的來說，SYBR Green I方法是一種最基礎(chǔ)也最常用的Real-time qPCR實驗手段。
| 產(chǎn)品名稱 |
埃希氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
| 英文名稱 |
Escherichia spp. |
| 貨號 |
XGR96730 |
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括絕對定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
扁蓄苷AvicularinHPLC≥98%,20mg/支; 組織IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 虎紅氯霉素瓊脂基礎(chǔ) (CM0549) Oxoid incubation media 虎紅氯霉素瓊脂基礎(chǔ) (CM0549) Oxoid 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3 溶液0，05mol/(0.1)NA
滇楸Catalpa fargesii f. duclouxii 荷花三桂花糖 A 137941-45-8 C22H30O14 ≥96.5% 塑料添加劑 09：抗氧劑1010(P2155009 大鼠磺基轉(zhuǎn)移酶(SULT1A1)ELISA試劑盒 ，英文名： SULT1A1 ELISA Kit 十六烷三甲基溴化銨埃希氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media 十六烷三甲基溴化銨瓊脂基礎(chǔ) 250(g) 魚源細(xì)胞 109-92-2基etxyl vinyl
滇楸Catalpa fargesii f. duclouxii 荷花三桂花糖 A 137941-45-8 C22H30O14 ≥96.5% 塑料添加劑 09：抗氧劑1010(P2155009 大鼠磺基轉(zhuǎn)移酶(SULT1A1)ELISA試劑盒 ，英文名： SULT1A1 ELISA Kit 十六烷三甲基溴化銨瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media 十六烷三甲基溴化銨瓊脂基礎(chǔ) 250(g) 魚源細(xì)胞 109-92-2基etxyl vinyl
Fragransin A2 FRAGRANSIN A2 112652-46-7 通用AP酶聯(lián)檢測封閉溶液100毫升 單核增生李斯特菌 食用，藥用止血 支/瓶 FO 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 抗生Ⅶ號培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：25克
熒光化學(xué)物質(zhì)：
埃希氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料?，F(xiàn)將其原理簡述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴(kuò)增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進(jìn)行基因定量分析，又可分析基因突變（SNP），有望成為基因診斷和個體化用藥分析的首選技術(shù)平臺。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進(jìn)行結(jié)合，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應(yīng)是否特異。
3. 分子信標(biāo)：是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標(biāo)記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補(bǔ)配對，導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)緊緊靠近，不會產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后，退火過程中，分子信標(biāo)中間部分與特定DNA序列配對，熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 。
關(guān)鍵字： 埃希氏菌通用探;探針法;熒光定量PCR試劑盒;Escherichia spp.;XGR96730;
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