中文名稱:牛源性成分(Bovine)核酸試劑盒 | 保存條件: 低溫冷藏 |
純度規(guī)格: 詳見說明書 | 產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 核酸檢測(cè)試劑盒 |
產(chǎn)品名稱:牛源性成分(Bovine)核酸試劑盒
英文名稱:詳見說明書
編號(hào): FSP3036
分類:核酸檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human MECOM (MDS1 and EVI1 complex locus protein EVI1) ELISA KITMouse PDGFD(Platelet Derived Growth Factor D) ELISA Kit四氧化三錳細(xì)胞涂片巴氏(papanicolaou;PAP)染色試劑盒
Human MS4A1(B-lymphocyte antigen CD20) ELISA KitMouse PDGFRL(Platelet Derived Growth Factor Receptor Like Protein) ELISA Kit3-甲基吡啶-N-氧化物石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)馬森(MASSON)染色試劑盒
Human MPST (3-mercaptopyruvate sulfurtransferase) ELISA KITMouse PDGFsR-α(Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α) ELISA Kit3-甲基吡啶-N-氧化物冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)馬森(MASSON)染色試劑盒
Human ADAM17(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17) ELISA KitMouse PDHa(Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit2-甲氧基-5-甲基苯胺石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)摩羅利 (mallory)染色試劑盒
Human MREG (Melanoregulin) ELISA KITMouse PDI(Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit2-甲氧基-5-甲基苯胺冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)摩羅利 (mallory)染色試劑盒
Human MADD (MAP kinase-activating death domain protein) ELISA KITMouse PDIA3(Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit3-噻吩甲酸甲酯石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試劑盒
Human MAS1 (Proto-oncogene Mas) ELISA KITMouse PEDF(Pigment Epithelium Derived Factor) ELISA Kit3-噻吩甲酸甲酯冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試劑盒
Human MAMLD1 (Mastermind-like domain-containing protein 1) ELISA KITMouse Pg(Progesterone) ELISA Kit3-噻吩甲酸甲酯石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT) 染色試劑盒
牛源性成分(Bovine)核酸試劑盒Apolipoprotein E4 英文名稱: 載脂蛋白E4抗體 0.2ml
Anti-Phospho-C/EBPalpha (Thr222/226) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
T(Mouse Testoterone)ELISA Kit 小鼠睪酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Collagen V /FITC 熒光素標(biāo)記抗Ⅴ型膠原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DGAT1/Diglyceride acyltransferase 二脂酰甘油?;D(zhuǎn)移酶抗體
Goat Anti-human IgA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗人IgA 0.1ml
Phospho-LRP6 (Ser1490) 英文名稱: 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 0.1ml
成立日期 | 2012-05-02 (13年) | 注冊(cè)資本 | 550 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬(wàn)以內(nèi) |
主營(yíng)行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué) | 經(jīng)營(yíng)模式 | 貿(mào)易,工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價(jià)格 | 公司名稱 | 報(bào)價(jià)日期 | |
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¥2490 |
VIP6年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2025-01-14 | |
¥1490 |
VIP6年
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上??道噬锟萍加邢薰?/div>
|
2025-01-14 | |
¥2990 |
VIP1年
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上海晶風(fēng)生物科技有限公司
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2025-01-14 |