產(chǎn)品名稱：傳染性對蝦皮下和造血器官壞死病毒(IHHNV)核酸試劑盒
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2938
分類：核酸檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Human GAPDH(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) ELISA KitMouse Rln3(Relaxin-3) ELISA KitN-甲基吡咯烷酮（NMP）抗體/蛋白HRP標記制備試劑盒
Human MASP1(Mannan-binding lectin serine protease 1) ELISA KitMouse Serpina6(Corticosteroid-binding globulin) ELISA KitN-甲基吡咯烷酮（NMP）抗體/蛋白AP標記制備試劑盒
Human LSS(Lanosterol synthase) ELISA KitMouse Cryab(Alpha-crystallin B chain) ELISA KitN-甲基吡咯烷酮（NMP）抗體/蛋白生物素標記制備試劑盒
Human IDE(Insulin-degrading enzyme) ELISA KitMouse Gusb(Beta-glucuronidase) ELISA Kit無水氯化鎂抗體蛋白質(zhì)A標記制備試劑盒
Human IFI16(Gamma-interferon-inducible protein 16) ELISA KitMouse Gpt(Alanine aminotransferase 1) ELISA Kit9-甲氧基喜樹堿病毒HRP標記制備試劑盒
Human KLK7(Kallikrein-7) ELISA KitMouse Fbln5(Fibulin-5) ELISA Kit3-氨基吡嗪-2-羧酸甲酯蛋白電泳2倍樣品處理液
Human FPR2(N-formyl peptide receptor 2) ELISA KitMouse Lipf(Gastric triacylglycerol lipase) ELISA Kit3-氨基吡嗪-2-羧酸甲酯蛋白電泳10倍濃縮運行緩沖液
Human ACAN(Aggrecan core protein) ELISA KitMouse Vav3(Guanine nucleotide exchange factor VAV3) ELISA Kit3,4-亞甲二氧基肉桂酸40%ACRYLAMIDE-BIS（19:1）溶液
傳染性對蝦皮下和造血器官壞死病毒(IHHNV)核酸試劑盒LST1淋巴細胞特異性轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml 亞砜-d6 99.9原子%D(>99.0%(GC)) Dimethyl Sulfoxide-d6 99.9atom%D
關(guān)鍵字： 傳染性對蝦皮下和造血器官壞死病毒(IHH;核酸試劑盒;48T;FSP2938;
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