PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核酸檢測(cè)試劑盒
英文名稱:詳見(jiàn)說(shuō)明書
編號(hào): FSP2888
分類:核酸檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human NFKB2(Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit) ELISA KitHuman CORT(Corticosterone) ELISA Kit十二烷基硫酸鋰特定微型RNA目標(biāo)基因探測(cè)技術(shù)試劑盒
Human CCDC82(Coiled-coil domain-containing protein 82) ELISA KitHuman PGRN(Progranulin) ELISA Kit十二烷基硫酸鋰微型RNA(miRNA)同位素探針制備試劑盒
Human APOC4(Apolipoprotein C-IV) ELISA KitHuman CFHR2(Complement factor H-related protein 2) ELISA KitL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽特定微型RNA(miRNA)擴(kuò)增引物合成
Human S100A2(Protein S100-A2) ELISA KitHuman CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) ELISA KitL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽特定成熟微型RNA(miRNA)分子合成
Human COMT(Catechol O-methyltransferase) ELISA KitHuman DSP(Dentin Sialoprotein) ELISA KitL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽特定成熟微型RNA(miRNA)反義抑制劑合成
Human CCT8L1P(Putative T-complex protein 1 subunit theta-like 1) ELISA KitHuman S100 Protein ELISA KitL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽特定成熟微型RNA(miRNA)2位修飾抑制劑合成
Human DHFR(Dihydrofolate reductase) ELISA KitHuman CLUSTERIN ANTIBODY(CLUSTERIN ANTIBODY) ELISA Kit酒石酸氧銻鉀微型RNA(miRNA)目標(biāo)基因探測(cè)試劑盒
Human IFNA10(Interferon alpha-10) ELISA KitHuman CCL1(Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit酒石酸氧銻鉀微型RNA(miRNA)表達(dá)載體連接試劑盒
口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核酸檢測(cè)試劑盒TQ1 馬來(lái)酰亞胺20mg 1072-97-5Rat Factor Ⅷ-related Antigen, FⅧAg Elisa KitHPLC98%TQ1 馬來(lái)酰亞胺20mgpro-IL-1β進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)英文名稱:Methoxyflurane1ml重組 Human Serum Albumin / HSA / ALB 蛋白特價(jià)供應(yīng)7554-90-796T粘蛋白17(MUC17)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ1 馬來(lái)酰亞胺20mgpro-IL-1β68-41-7高端化學(xué)試劑Human Brain derived neurotrophic facor, BDNF Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:50mg重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白現(xiàn)貨促銷560-66-796T性別決定區(qū)Y框蛋白1(SOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ1 琥珀酰亞胺酯20mgRORC268-41-7高端化學(xué)試劑Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit
TQ1 琥珀酰亞胺酯20mg 1072-98-6Rat Factor Ⅷ-related Antigen, FⅧAg Elisa KitHPLC98%TQ1 琥珀酰亞胺酯20mgRORC2進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:50mg重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白現(xiàn)貨促銷560-66-796T性別決定區(qū)Y框蛋白1(SOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ1 琥珀酰亞胺酯20mgRORC268-41-7高端化學(xué)試劑Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)英文名稱:50mg重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷127191-86-096T性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ2酸 20mgMAC68-41-7高端化學(xué)試劑Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit
TQ2酸 20mg 1072-98-6Rat Pyruvate Kinase, M2-PK Elisa KitHPLC98%TQ2酸 20mgMAC進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)英文名稱:50mg重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷127191-86-096T性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ2酸 20mgMAC68-41-7高端化學(xué)試劑Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:Cathinone Hydrochloride CI50mg重組人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 標(biāo)簽)41365-32-696T性別決定區(qū)Y框蛋白3(SOX3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ2胺 20mgAPMAP534-03-2高端化學(xué)試劑Human Activin A, ACV-A Elisa Kit
TQ2胺 20mg 1072-98-6Rat Pyruvate Kinase, M2-PK Elisa KitHPLC98%TQ2胺 20mgAPMAP進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:Cathinone Hydrochloride CI50mg重組人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 標(biāo)簽)41365-32-696T性別決定區(qū)Y框蛋白3(SOX3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ2胺 20mgAPMAP534-03-2高端化學(xué)試劑Human Activin A, ACV-A Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)英文名稱:Triamcinolone Acetonide500mg重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白特價(jià)供應(yīng)17313-52-996T激肽釋放酶9(KLK9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ2 CPG *500 Å*20mgCYP19A1534-03-2高端化學(xué)試劑Human Activin A, ACV-A Elisa Kit
TQ2 CPG *500 Å*20mg 1073-05-8Rat acetylcholine receptor antibody, AChRab Elisa KitHPLC98%TQ2 CPG *500 Å*20mgCYP19A1進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)英文名稱:Triamcinolone Acetonide500mg重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白特價(jià)供應(yīng)17313-52-996T激肽釋放酶9(KLK9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ2 CPG *500 Å*20mgCYP19A1534-03-2高端化學(xué)試劑Human Activin A, ACV-A Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR,90%英文名稱:Clidinium Bromide500mg重組人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白現(xiàn)貨促銷160896-49-196T視網(wǎng)膜鈣黏附蛋白(RCAD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC99%TQ2 CPG *1000 Å*20mgCD47534-03-2高端化學(xué)試劑human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit
TQ2 CPG *1000 Å*20mg 1073-05-8Rat acetylcholine receptor antibody, AChRab Elisa KitHPLC99%TQ2 CPG *1000 Å*20mgCD47進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR,90%英文名稱:Clidinium Bromide500mg重組人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白現(xiàn)貨促銷160896-49-196T視網(wǎng)膜鈣黏附蛋白(RCAD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC99%TQ2 CPG *1000 Å*20mgCD47534-03-2高端化學(xué)試劑human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:Enalapril Maleate200mg重組人 CARKL / SHPK 蛋白特價(jià)促銷104195-61-196TGATA結(jié)合蛋白3(GATA3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ2馬來(lái)酰亞胺 20mgA1616-91-1高端化學(xué)試劑human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit
TQ2馬來(lái)酰亞胺 20mg 1073-05-8Rat Gamma-aminobutyric acid, GABA Elisa KitHPLC98%TQ2馬來(lái)酰亞胺 20mgA1進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:Enalapril Maleate200mg重組人 CARKL / SHPK 蛋白特價(jià)促銷104195-61-196TGATA結(jié)合蛋白3(GATA3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ2馬來(lái)酰亞胺 20mgA1616-91-1高端化學(xué)試劑human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)英文名稱:Beta Cyclodextrin250mg重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390)76296-73-696T鈣非依賴性脂酶A2(iPLA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC99%TQ2琥珀酰亞胺酯 20mgCD68616-91-1高端化學(xué)試劑Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit
TQ2琥珀酰亞胺酯 20mg 1073-06-9Rat Gamma-aminobutyric acid, GABA Elisa KitHPLC99%TQ2琥珀酰亞胺酯 20mgCD68進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)英文名稱:Beta Cyclodextrin250mg重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390)76296-73-696T鈣非依賴性脂酶A2(iPLA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC99%TQ2琥珀酰亞胺酯 20mgCD68616-91-1高端化學(xué)試劑Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)診斷試劑用英文名稱:20mg重組人 CD300A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)76296-74-796Tα-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%TQ3 酸20mgPⅡCP616-91-1高端化學(xué)試劑Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit
TQ3 酸20mg 1073-06-9Rat 5-Hydroxytryptamine, 5HT Elisa KitHPLC95%TQ3 酸20mgPⅡCP進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)診斷試劑用英文名稱:20mg重組人 CD300A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)76296-74-796Tα-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%TQ3 酸20mgPⅡCP616-91-1高端化學(xué)試劑Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:Cefmenoxime Hydrochloride350mg重組人 BTC / Betacellulin 蛋白現(xiàn)貨促銷136040-43-296T粘蛋白1(MUC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%TQ3胺20mgPⅡBNP616-91-1高端化學(xué)試劑Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit
TQ3胺20mg 1073-06-9Rat 5-Hydroxytryptamine, 5HT Elisa KitHPLC95%TQ3胺20mgPⅡBNP進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:Cefmenoxime Hydrochloride350mg重組人 BTC / Betacellulin 蛋白現(xiàn)貨促銷136040-43-296T粘蛋白1(MUC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%TQ3胺20mgPⅡBNP616-91-1高端化學(xué)試劑Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BR英文名稱:Leflunomide200mg重組人 SLAMF6 / Ly108 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)特價(jià)促銷96562-88-896T性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%TQ3 CPG *500 Å*20mgPⅡANP616-91-1高端化學(xué)試劑Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字: 口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核酸檢測(cè)試;核酸檢測(cè)試劑盒;48T;FSP2888;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
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