PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱:豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)核酸檢測試劑盒
英文名稱:詳見說明書
編號: FSP2882
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) ELISA KitHuman A16-IgM(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin M) ELISA Kit氘代氫化鋰鋁一步法RT-PCR試劑盒
Human SKP2(S-phase kinase-associated protein 2) ELISA KitHuman HP-IgG(Helicobcter Pylori-Immunoglobulin G) ELISA Kit氘代氫化鋰鋁直接細胞克隆兩步法逆轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒
Human SPAG1(Sperm-associated antigen 1) ELISA KitHuman MP-IgG(Mycoplasma pneumoniae-Immunoglobulin G) ELISA KitL-瓜氨酸兩步法RT-PCR熒光定量試劑盒
Human CHID1(Chitinase domain-containing protein 1) ELISA KitHuman MP-IgM(Mycoplasma pneumoniae-Immunoglobulin M) ELISA KitL-瓜氨酸逆轉(zhuǎn)錄RT試劑盒
Human DUSP1(Dual specificity protein phosphatase 1) ELISA KitHuman CP-IgG(chlamydia pneumoniae-Immunoglobulin G) ELISA KitL-叔亮氨醇體外RNA轉(zhuǎn)錄合成試劑盒
Human PARP2(Poly [ADP-ribose] polymerase 2) ELISA KitHuman CP-IgM(chlamydia pneumoniae-Immunoglobulin M) ELISA KitL-叔亮氨醇體外加帽RNA轉(zhuǎn)錄合成試劑盒
Human GPX3(Glutathione peroxidase 3) ELISA KitHuman MV-IgG(Measles virus-Immunoglobulin G) ELISA KitL-叔亮氨醇RNasin(核糖核酸酶抑制劑)
Human CTSF(Cathepsin F) ELISA KitHuman MV-IgM(Measles virus-Immunoglobulin M) ELISA KitL-蘋果酸MMLV(H點突變)
豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)核酸檢測試劑盒2-氨基吖啶酮 5mg 104-86-9Rat Glycogen phosphorylase BB, GP-BB Elisa KitHPLC98%2-氨基吖啶酮 5mgEP2進口、國產(chǎn)200英文名稱:25mg重組人 S100A4 蛋白 (His 標簽)特價供應(yīng)20310-89-896T轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%2-氨基吖啶酮 5mgEP26600-40-4高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 4, IGFBP-4 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)250英文名稱:15mg重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白現(xiàn)貨促銷17008-65-096T轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS酸5mgTDR6600-40-4高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit
EDANS酸5mg 104-86-9Rat Glycogen phosphorylase BB, GP-BB Elisa KitHPLC98%EDANS酸5mgTDR進口、國產(chǎn)250英文名稱:15mg重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白現(xiàn)貨促銷17008-65-096T轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS酸5mgTDR6600-40-4高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)250英文名稱:15mg重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 (His 標簽)特價促銷19865-76-096T干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS酸5mgNestin 2013-12-9高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit
EDANS酸5mg 104-86-9Rat Thyroxine antibody, TAb Elisa KitHPLC98%EDANS酸5mgNestin進口、國產(chǎn)250英文名稱:15mg重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 (His 標簽)特價促銷19865-76-096T干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS酸5mgNestin 2013-12-9高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)100英文名稱:Methyl Ethyl Ketone1.2ml×3ampules重組人 KEAP1 / INRF2 蛋白 (His & GST 標簽)20958-18-396T心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS鈉鹽5mgART1 2013-12-9高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit
EDANS鈉鹽5mg 104-93-8Rat Thyroxine antibody, TAb Elisa KitHPLC98%EDANS鈉鹽5mgART1進口、國產(chǎn)100英文名稱:Methyl Ethyl Ketone1.2ml×3ampules重組人 KEAP1 / INRF2 蛋白 (His & GST 標簽)20958-18-396T心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS鈉鹽5mgART1 2013-12-9高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)100英文名稱:2-Butanol1.2ml×3ampules重組人 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標簽)特價供應(yīng)24915-04-696T抗繆勒管激素(AMH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS鈉鹽5mgYFV-IgM 2013-12-9高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit
EDANS鈉鹽5mg 104-93-8Rat thyroid stimulating hormone receptor antidoby, TRAb Elisa KitHPLC98%EDANS鈉鹽5mgYFV-IgM進口、國產(chǎn)100英文名稱:2-Butanol1.2ml×3ampules重組人 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標簽)特價供應(yīng)24915-04-696T抗繆勒管激素(AMH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS鈉鹽5mgYFV-IgM 2013-12-9高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)100英文名稱:2-Methyl-1-propanol1.2ml×3ampules重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白現(xiàn)貨促銷33627-28-096T絲氨酸蛋白酶1(PRSS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS C2 馬來酰亞胺5mgHBD-130327-56-0高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit
EDANS C2 馬來酰亞胺5mg 104-93-8Rat thyroid stimulating hormone receptor antidoby, TRAb Elisa KitHPLC98%EDANS C2 馬來酰亞胺5mgHBD-130進口、國產(chǎn)100英文名稱:2-Methyl-1-propanol1.2ml×3ampules重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白現(xiàn)貨促銷33627-28-096T絲氨酸蛋白酶1(PRSS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS C2 馬來酰亞胺5mgHBD-130327-56-0高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)BR英文名稱:Flumazenil200mg重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標簽)特價促銷110241-19-596T著絲粒蛋白I(CENPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS 碘乙酰胺5mgHBxAg327-56-0高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit
EDANS 碘乙酰胺5mg 105-09-9Rat catecholamine, CA Elisa KitHPLC98%EDANS 碘乙酰胺5mgHBxAg進口、國產(chǎn)BR英文名稱:Flumazenil200mg重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標簽)特價促銷110241-19-596T著絲粒蛋白I(CENPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%EDANS 碘乙酰胺5mgHBxAg327-56-0高端化學試劑Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)BR英文名稱:Terbinafine Hydrochloride 200mg重組人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 標簽)86377-52-896T免疫球蛋白G4(IgG4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三鈉鹽5mgHAS1327-56-0高端化學試劑Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit
8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三鈉鹽5mg 105-09-9Rat catecholamine, CA Elisa KitHPLC98%8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三鈉鹽5mgHAS1進口、國產(chǎn)BR英文名稱:Terbinafine Hydrochloride 200mg重組人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 標簽)86377-52-896T免疫球蛋白G4(IgG4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三鈉鹽5mgHAS1327-56-0高端化學試劑Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)BR英文名稱:20mg重組人 CD47 蛋白 (Fc 標簽)特價供應(yīng)294674-09-296T補體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%mBBr 5mgHAS3327-57-1高端化學試劑Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit
mBBr 5mg 105-11-3Rat Interleukin 27, IL-27 Elisa KitHPLC98%mBBr 5mgHAS3進口、國產(chǎn)BR英文名稱:20mg重組人 CD47 蛋白 (Fc 標簽)特價供應(yīng)294674-09-296T補體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%mBBr 5mgHAS3327-57-1高端化學試劑Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)蛋白組級英文名稱:Carisoprodol1g重組人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 (aa 1-268, 196 Met/Arg, His 標簽)現(xiàn)貨促銷149507-55-196T前列腺素F受體(FP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%bBBr5mgUdgIgA327-57-1高端化學試劑Human insulin-like growth factors 1, IGF-1 Elisa Kit
bBBr5mg 105-11-3Rat Interleukin 27, IL-27 Elisa KitHPLC98%bBBr5mgUdgIgA進口、國產(chǎn)蛋白組級英文名稱:Carisoprodol1g重組人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 (aa 1-268, 196 Met/Arg, His 標簽)現(xiàn)貨促銷149507-55-196T前列腺素F受體(FP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%bBBr5mgUdgIgA327-57-1高端化學試劑Human insulin-like growth factors 1, IGF-1 Elisa Kit 進口、國產(chǎn)BR英文名稱:Ceftazidime Pentahydrate300mg重組人 PROC1 / Protein C / PROC 蛋白 (His 標簽)特價促銷508182-41-096T前列腺素E受體2(EP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%Dansyl 尸胺5mgHAS1327-57-1高端化學試劑Human insulin-like growth factors 1, IGF-1 Elisa Kit
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字: 豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV);核酸檢測試劑盒;48T;FSP2882;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學院、復(fù)旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學,暨南大學,南京工業(yè)大學,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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