PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因植物cryA基因PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
編號(hào)： FSP2828
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human PCI(Protein C Inhibitor) ELISA KitHuman PGF2α(Prostaglandin F2α) ELISA Kit異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG) 細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA KitHuman PGRP-S(Peptidoglycan Recognition Protein-S) ELISA Kit異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG) GSK-3BETA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA KitHuman PHB(Prohibitin) ELISA Kit異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)GSK-3BETA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA KitHuman PIK3Cβ(Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Beta Polypeptide) ELISA Kit亞硝酸異戊酯GSK-3BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA KitHuman PK(Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit對(duì)碘苯甲酸 細(xì)胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒
Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA KitHuman PK2(Prokineticin 2) ELISA Kit對(duì)碘苯甲酸載玻片細(xì)胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human NT-ProANP(N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA KitHuman PKC(Protein Kinase C) ELISA Kit硝酸鐵(III),九水合物冰凍切片組織PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA KitHuman PKCβ1(Protein Kinase C Beta 1) ELISA Kit異丁醛石蠟切片組織PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物cryA基因PCR檢測(cè)試劑盒17-α-羥化酶檢測(cè)試劑盒5mg538-24-9Rat soluble Interleukin 2 recepter, IL-2sR Elisa KitHPLC98%17-α-羥化酶檢測(cè)試劑盒5mgADAMTS410mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 50目7724-76-72061-64-596T凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%17-α-羥化酶檢測(cè)試劑盒5mgADAMTS481-93-6高端化學(xué)試劑腎酶(RNLS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 60目59756-60-41859-87-696T凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%16α羥基雌酮1檢測(cè)試劑盒5mgOPGL2609-88-3高端化學(xué)試劑γ-內(nèi)啡肽(γEP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
16α羥基雌酮1檢測(cè)試劑盒5mg538-24-9Rat soluble Interleukin 2 recepter, IL-2sR Elisa KitHPLC98%16α羥基雌酮1檢測(cè)試劑盒5mgOPGL50mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 60目59756-60-41859-87-696T凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%16α羥基雌酮1檢測(cè)試劑盒5mgOPGL2609-88-3高端化學(xué)試劑γ-內(nèi)啡肽(γEP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)eaCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 70目56425-91-3115458-73-696T粘蛋白5B(MUC5B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%15-羥基前列腺素脫氫酶檢測(cè)試劑盒5mgON2609-88-3高端化學(xué)試劑低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
15-羥基前列腺素脫氫酶檢測(cè)試劑盒5mg636-61-3Rat Netrin-1, Ntn1 Elisa KitHPLC98%15-羥基前列腺素脫氫酶檢測(cè)試劑盒5mgONeaCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 70目56425-91-3115458-73-696T粘蛋白5B(MUC5B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%15-羥基前列腺素脫氫酶檢測(cè)試劑盒5mgON2609-88-3高端化學(xué)試劑低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 80目1071-83-6137941-45-896T催乳素(PRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%15-epi-氧脂素 A4檢測(cè)試劑盒5mgHAV3564-18-9高端化學(xué)試劑抗原肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
15-epi-氧脂素 A4檢測(cè)試劑盒5mg636-61-3Rat Netrin-1, Ntn1 Elisa KitHPLC98%15-epi-氧脂素 A4檢測(cè)試劑盒5mgHAV25mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 80目1071-83-6137941-45-896T催乳素(PRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%15-epi-氧脂素 A4檢測(cè)試劑盒5mgHAV3564-18-9高端化學(xué)試劑抗原肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 100目1071-83-621887-01-496T蛋白酪氨酸酸酶受體N(PTPRN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%14-3-3 蛋白 beta/alpha檢測(cè)試劑盒5mgHDV3564-18-9高端化學(xué)試劑心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
14-3-3 蛋白 beta/alpha檢測(cè)試劑盒5mg636-61-3Rat Lactate Dehydrogenase, LDH Elisa KitHPLC98%14-3-3 蛋白 beta/alpha檢測(cè)試劑盒5mgHDV25mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 100目1071-83-621887-01-496T蛋白酪氨酸酸酶受體N(PTPRN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%14-3-3 蛋白 beta/alpha檢測(cè)試劑盒5mgHDV3564-18-9高端化學(xué)試劑心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)100mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 120目21087-64-9486-39-596T親環(huán)素B(CYPB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%12-脂氧化酶/脂加氧酶檢測(cè)試劑盒5mgHSVI3564-18-9高端化學(xué)試劑Y-染色體胸腺素β4(Tβ4Y)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
甜菊糖12-脂氧化酶/脂加氧酶檢測(cè)試劑盒5mg148-79-8Rat Lactate Dehydrogenase, LDH Elisa KitHPLC98%12-脂氧化酶/脂加氧酶檢測(cè)試劑盒5mgHSVI100mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 120目21087-64-9486-39-596T親環(huán)素B(CYPB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%12-脂氧化酶/脂加氧酶檢測(cè)試劑盒5mgHSVI3564-18-9高端化學(xué)試劑Y-染色體胸腺素β4(Tβ4Y)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)30mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 150目21087-64-982354-38-996T抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%12羥二十烷四烯酸檢測(cè)試劑盒5mgHSVII66675-89-6高端化學(xué)試劑腎臟腦蛋白(KIBRA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
天麻苷12羥二十烷四烯酸檢測(cè)試劑盒5mg148-79-8Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody, MAG Ab Elisa KitHPLC98%12羥二十烷四烯酸檢測(cè)試劑盒5mgHSVII30mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 150目21087-64-982354-38-996T抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%12羥二十烷四烯酸檢測(cè)試劑盒5mgHSVII66675-89-6高端化學(xué)試劑腎臟腦蛋白(KIBRA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)eaCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 180目120-23-082375-29-996T溶菌酶(LZM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%11-脫氧皮質(zhì)醇ELISA試劑盒5mgHSVIII14038-43-8高端化學(xué)試劑細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅳ亞型1(COX4I1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
烏蘇酸;烏索酸11-脫氧皮質(zhì)醇ELISA試劑盒5mg148-79-8Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody, MAG Ab Elisa KitHPLC98%11-脫氧皮質(zhì)醇ELISA試劑盒5mgHSVIIIeaCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 180目120-23-082375-29-996T溶菌酶(LZM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%11-脫氧皮質(zhì)醇ELISA試劑盒5mgHSVIII14038-43-8高端化學(xué)試劑細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅳ亞型1(COX4I1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)20mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 200目120-23-0142566-61-896T干擾素β(IFNβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%11去氫血栓烷B2檢測(cè)試劑盒20mgPV14038-43-8高端化學(xué)試劑細(xì)胞色素b-245β肽(CYBβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
11去氫血栓烷B2檢測(cè)試劑盒20mg10004-44-1Rat C-telopeptide of type Ⅰ collagen, CTX-Ⅰ Elisa KitHPLC98%11去氫血栓烷B2檢測(cè)試劑盒20mgPV20mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 200目120-23-0142566-61-896T干擾素β(IFNβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%11去氫血栓烷B2檢測(cè)試劑盒20mgPV14038-43-8高端化學(xué)試劑細(xì)胞色素b-245β肽(CYBβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)20mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 300目10042-71-4549-32-696T核糖核酸酶A3(RNASE3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%11β羥類固醇脫氫酶1型檢測(cè)試劑盒5mgADAMTS71406-65-1高端化學(xué)試劑左右決定因子2(LEFTY2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
辛福林堿;辛佛寧;交感醇;昔奈福林11β羥類固醇脫氫酶1型檢測(cè)試劑盒5mg10004-44-1Rat C-telopeptide of type Ⅰ collagen, CTX-Ⅰ Elisa KitHPLC98%11β羥類固醇脫氫酶1型檢測(cè)試劑盒5mgADAMTS720mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 300目10042-71-4549-32-696T核糖核酸酶A3(RNASE3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%11β羥類固醇脫氫酶1型檢測(cè)試劑盒5mgADAMTS71406-65-1高端化學(xué)試劑左右決定因子2(LEFTY2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)500mgCAS號(hào)：細(xì)胞過(guò)濾篩 400目10042-71-452525-35-696T血管緊張素Ⅱ受體1(AGTR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨檢測(cè)試劑盒5mgADAMTS121406-65-1高端化學(xué)試劑酪蛋白激酶1δ(CSNK1δ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字： 轉(zhuǎn)基因植物cryA基因;PCR檢測(cè)試劑盒;50T;FSP2828;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門(mén)針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對(duì)各種動(dòng)物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú)）的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù)，力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的，更專業(yè)的服務(wù)！
公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問(wèn)題可申請(qǐng)退換，有技術(shù)疑問(wèn)可隨時(shí)給于解答，一對(duì)一的客服服務(wù)，客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。