PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng)：豬乙型腦炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)：詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
編號(hào)： FSP2822
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human PKR2(Prokineticin Receptor 2) ELISA KitHuman OCT(Ornithine Carbamoyl Transferase) ELISA Kit三氯化銦 四水合物 細(xì)胞TSH-BETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
Human PL(Placental Lactogen) ELISA KitHuman OFQ/N(Orphanin FQ/Nociceptin) ELISA Kit吲哚 TSH-BETA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
Human PLA1(Phospholipase A1) ELISA KitHuman OLAb(Anti-Oxidized Low Density Lipoprotein Antibody) ELISA Kit吲哚TSH-BETA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
Human PGF2α(Prostaglandin F2α) ELISA KitHuman OLFM4(Olfactomedin 4) ELISA Kit碘乙腈TSH-BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
Human PGD2S(Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA KitHuman ON(Osteonectin) ELISA Kit碘乙腈 細(xì)胞IL蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒
Human PLA2G10(Phospholipase A2, Group X) ELISA KitHuman OTR(Oxytocin Receptor) ELISA Kit鐵粉載玻片細(xì)胞IL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human PLA2G12B(Phospholipase A2, Group XII B) ELISA KitHuman OVA sIgE(Ovalbumin Specific IgE) ELISA Kit鐵粉冰凍切片組織IL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human PLA2G4D(Phospholipase A2, Group IV D) ELISA KitHuman OVA sIgG(Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit還原鐵粉石蠟切片組織IL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
豬乙型腦炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒葛根黃酮8羥基脫氧鳥(niǎo)苷檢測(cè)試劑盒5mg153-98-0Mouse L-Selectin Elisa Kit HPLC98%8羥基脫氧鳥(niǎo)苷檢測(cè)試劑盒5mgPDE22mlCAS號(hào)：透析袋 MD44(8000-14000)D 美國(guó)68157-60-81244-58-296T環(huán)加氧酶2(PTGS2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%8羥基脫氧鳥(niǎo)苷檢測(cè)試劑盒5mgPDE254970-72-8高端化學(xué)試劑重肽神經(jīng)絲蛋白(NEFH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)75mgCAS號(hào)：透析袋 MD55(3500D ) 美國(guó)11024-24-113956-29-196TDickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶檢測(cè)試劑盒5mgGPX14348-40-4高端化學(xué)試劑鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(SGLT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶檢測(cè)試劑盒5mg625-82-1Mouse L-Selectin Elisa Kit HPLC98%8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶檢測(cè)試劑盒5mgGPX75mgCAS號(hào)：透析袋 MD55(3500D ) 美國(guó)11024-24-113956-29-196TDickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶檢測(cè)試劑盒5mgGPX14348-40-4高端化學(xué)試劑鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(SGLT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：透析袋 MD55(7000D ) 美國(guó)11024-24-164052-90-096T羥賴(lài)氨酸(Hyl)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6酮前列腺素F1a檢測(cè)試劑盒5mgRECQL-514348-40-4高端化學(xué)試劑鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(SGLT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
黃芪甲甙；黃芪皂苷IV6酮前列腺素F1a檢測(cè)試劑盒5mg625-82-1BUN Elisa KitHPLC98%6酮前列腺素F1a檢測(cè)試劑盒5mgRECQL-550mgCAS號(hào)：透析袋 MD55(7000D ) 美國(guó)11024-24-164052-90-096T羥賴(lài)氨酸(Hyl)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6酮前列腺素F1a檢測(cè)試劑盒5mgRECQL-514348-40-4高端化學(xué)試劑鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(SGLT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：透析袋 MD55(8000-14000)D 美國(guó)92-48-820675-51-896T金屬蛋白3(MT3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6酮前列腺素檢測(cè)試劑盒5mgapo-A14348-40-4高端化學(xué)試劑睪丸陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
黃芪皂甙I6酮前列腺素檢測(cè)試劑盒5mg625-82-1BUN lisa KitHPLC98%6酮前列腺素檢測(cè)試劑盒5mgapo-A50mgCAS號(hào)：透析袋 MD55(8000-14000)D 美國(guó)92-48-820675-51-896T金屬蛋白3(MT3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6酮前列腺素檢測(cè)試劑盒5mgapo-A14348-40-4高端化學(xué)試劑睪丸陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1mlCAS號(hào)：透析袋 MD77(8000-14000)D 美國(guó)92-48-870677-47-396T棕櫚?；さ鞍?(MPP5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-羥多巴胺檢測(cè)試劑盒5mgLp-A139-13-9高端化學(xué)試劑再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
黃芪皂甙II6-羥多巴胺檢測(cè)試劑盒5mg455-19-6 ALT Elisa KitHPLC98%6-羥多巴胺檢測(cè)試劑盒5mgLp-A1mlCAS號(hào)：透析袋 MD77(8000-14000)D 美國(guó)92-48-870677-47-396T棕櫚?；さ鞍?(MPP5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-羥多巴胺檢測(cè)試劑盒5mgLp-A139-13-9高端化學(xué)試劑再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)20mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬16 截留分子量30000092-48-8163136-19-496T內(nèi)嗎啡肽2(EM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%60S核糖體蛋白L36a-樣檢測(cè)試劑盒5mgEREG16009-13-5高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體1(GRIA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
黃芪皂甙III60S核糖體蛋白L36a-樣檢測(cè)試劑盒5mg455-19-6 ALT Elisa KitHPLC98%60S核糖體蛋白L36a-樣檢測(cè)試劑盒5mgEREG20mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬16 截留分子量30000092-48-8163136-19-496T內(nèi)嗎啡肽2(EM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%60S核糖體蛋白L36a-樣檢測(cè)試劑盒5mgEREG16009-13-5高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體1(GRIA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)100mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬16 截留分子量100000090-33-553452-34-996T粘蛋白5AC(MUC5AC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%60S核糖體蛋白L17檢測(cè)試劑盒5mgDERL116009-13-5高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體2(GRIA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
60S核糖體蛋白L17檢測(cè)試劑盒5mg455-19-6TLR4 Elisa KitHPLC98%60S核糖體蛋白L17檢測(cè)試劑盒5mgDERL1100mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬16 截留分子量100000090-33-553452-34-996T粘蛋白5AC(MUC5AC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%60S核糖體蛋白L17檢測(cè)試劑盒5mgDERL116009-13-5高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體2(GRIA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬18 截留分子量100090-33-517397-93-296T8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%5-羥色胺受體6檢測(cè)試劑盒5mgSTR16009-13-5高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體2(GRIA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
環(huán)維黃楊星D;環(huán)常綠黃楊堿D5-羥色胺受體6檢測(cè)試劑盒5mg617-36-7TLR4 Elisa KitHPLC98%5-羥色胺受體6檢測(cè)試劑盒5mgSTR50mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬18 截留分子量100090-33-517397-93-296T8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%5-羥色胺受體6檢測(cè)試劑盒5mgSTR16009-13-5高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體2(GRIA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬18 截留分子量200090-33-565907-75-796T胞漿型脂酶A2(cPLA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mgPCDH116009-13-5高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體3(GRIA3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
紅景天甙5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mg617-36-7HPLC98%5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mgPCDH150mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬18 截留分子量200090-33-565907-75-796T胞漿型脂酶A2(cPLA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mgPCDH116009-13-5高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體3(GRIA3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)20mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬18 截留分子量350024307-26-4477-84-996T褪黑素(MT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mgE604-44-4高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體4(GRIA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mg130-13-2HPLC98%5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mgE20mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬18 截留分子量350024307-26-4477-84-996T褪黑素(MT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mgE604-44-4高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體4(GRIA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：透析袋 即用型 扁寬18 截留分子量500024307-26-449624-66-096TⅠ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%5羥色胺/血清素/血清胺檢測(cè)試劑盒5mgGPP604-44-4高端化學(xué)試劑AMPA離子能谷氨酸受體4(GRIA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字： 豬乙型腦炎病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;50T;FSP2822;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷(xiāo)售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷(xiāo)售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專(zhuān)門(mén)針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對(duì)各種動(dòng)物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú)）的科研試劑。
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