儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:魚特定基因序列PCR 試劑盒
英文名稱:詳見說明書
編號(hào): FSP2772
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
Human CVB-IgM(Coxsackievirus B-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman ATF-3(Activating Transcription Factor 3) ELISA KitD-對(duì)羥基苯甘氨酸 載玻片細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human CVB-IgG(Coxsackievirus B-Immunoglobulin G) ELISA KitHuman ATF-4(Activating Transcription Factor 4) ELISA KitD-對(duì)羥基苯甘氨酸 冰凍切片組織PDGF-A蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human ECHO-IgG(Enteric CytopathicHuman Orphan virus-Immunoglobulin G) ELISA KitHuman ATF-6(Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit二氯二茂鉿 石蠟切片組織PDGF-A蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human ECHO-IgM(Enteric CytopathicHuman Orphan virus-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽 細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
Human HDV-IgM(Hepatitis D Virus-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman ATXN1(Ataxin 1) ELISA Kit1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽 細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
Human TOX-IgM(Toxoplasma-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman Aβ40(Amyloid Beta 40) ELISA Kit1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽 PDGF-A蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
Human TOX-IgG(Toxoplasma-Immunoglobulin G) ELISA KitHuman Aβ42(Amyloid Beta 42) ELISA Kit羥丙基纖維素PDGF-A蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
Human EV71-IgG(Enterovirus 71-Immunoglobulin G) ELISA KitHuman BACE1(Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit羥丙基纖維素PDGF-A蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
魚特定基因序列PCR 試劑盒超敏熱休克蛋白70檢測(cè)試劑盒20mgN,N-二乙基-1,1,2,3,3,3-六氟丙胺HPLC98%100mLUltra Sensitive Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA KitHPLC98%超敏熱休克蛋白70檢測(cè)試劑盒20mgPAP10mgCAS號(hào):虎紅瓊脂155141-29-0172481-83-396T鈣調(diào)酸酶(CaN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%超敏熱休克蛋白70檢測(cè)試劑盒20mgPAP29953-71-7高端化學(xué)試劑Abl交互子3(ABI3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào):酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂155141-29-0121104-96-996T鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%超敏熱休克蛋白60檢測(cè)試劑盒20mgHCV-IgM3121-70-8高端化學(xué)試劑胰多肽2(PPY2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
超敏熱休克蛋白60檢測(cè)試劑盒20mgN-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸HPLC98%100mLUltra Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA KitHPLC98%超敏熱休克蛋白60檢測(cè)試劑盒20mgHCV-IgM200mgCAS號(hào):酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂155141-29-0121104-96-996T鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%超敏熱休克蛋白60檢測(cè)試劑盒20mgHCV-IgM3121-70-8高端化學(xué)試劑胰多肽2(PPY2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào):代酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂(TCBS)1476-53-5290821-39-596T神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%超敏前列腺特異性抗原檢測(cè)試劑盒20mgHCV-Ab3121-70-8高端化學(xué)試劑O-巖藻糖肽3-β-N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶(RFNG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
超敏前列腺特異性抗原檢測(cè)試劑盒20mgN-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸HPLC98%100mLUltra Sensitive Prostate Specific Antigen,PSA U S ELISA KitHPLC98%超敏前列腺特異性抗原檢測(cè)試劑盒20mgHCV-Ab200mgCAS號(hào):代酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂(TCBS)1476-53-5290821-39-596T神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%超敏前列腺特異性抗原檢測(cè)試劑盒20mgHCV-Ab3121-70-8高端化學(xué)試劑O-巖藻糖肽3-β-N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶(RFNG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)100mgCAS號(hào):馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA培養(yǎng)基)1476-53-5350588-96-496T生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)蛋白43(GAP43)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)試劑盒10mgACT-IgG Ab 3094-09-5高端化學(xué)試劑RAD1同源物(RAD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)試劑盒10mgN-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸HPLC98%100mLhigh sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA KitHPLC98%超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)試劑盒10mgACT-IgG Ab100mgCAS號(hào):馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA培養(yǎng)基)1476-53-5350588-96-496T生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)蛋白43(GAP43)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)試劑盒10mgACT-IgG Ab 3094-09-5高端化學(xué)試劑RAD1同源物(RAD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào):麥芽提取物1476-53-577-95-296T肌腱蛋白R(shí)(TNR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)GC98%超酸化微管相關(guān)蛋白tau檢測(cè)試劑盒20mgsAPPα 3094-09-5高端化學(xué)試劑Nodal同源物(NODAL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
超酸化微管相關(guān)蛋白tau檢測(cè)試劑盒20mg(R)-3-Boc-氨基哌啶GC98%100mLhyper phosphorylated MAPT ELISA kitGC98%超酸化微管相關(guān)蛋白tau檢測(cè)試劑盒20mgsAPPα25mgCAS號(hào):麥芽提取物1476-53-577-95-296T肌腱蛋白R(shí)(TNR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)GC98%超酸化微管相關(guān)蛋白tau檢測(cè)試劑盒20mgsAPPα 3094-09-5高端化學(xué)試劑Nodal同源物(NODAL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)100mgCAS號(hào):麥康凱瓊脂7681-93-858-86-696T微管關(guān)聯(lián)蛋白2(MAP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC99%腸脂肪酸結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒20mgHPD 3094-09-5高端化學(xué)試劑N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶15(NαA15)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
腸脂肪酸結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒20mg(R)-3-Boc-氨基哌啶HPLC99%100mLiFABP ELISA KitHPLC99%腸脂肪酸結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒20mgHPD100mgCAS號(hào):麥康凱瓊脂7681-93-858-86-696T微管關(guān)聯(lián)蛋白2(MAP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC99%腸脂肪酸結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒20mgHPD 3094-09-5高端化學(xué)試劑N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶15(NαA15)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)350mgCAS號(hào):牛肉膏蛋白胨肉湯7681-93-8636-61-396T黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20(ME20M)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC90%腸三葉因子檢測(cè)試劑盒20mgCOPS210605-21-7高端化學(xué)試劑N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶50(NαA50)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
腸三葉因子檢測(cè)試劑盒20mg腺苷-5'-二酸三鋰HPLC90%100mLIntestinal trefoil factor,ITF ELISA KitHPLC90%腸三葉因子檢測(cè)試劑盒20mgCOPS2350mgCAS號(hào):牛肉膏蛋白胨肉湯7681-93-8636-61-396T黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20(ME20M)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC90%腸三葉因子檢測(cè)試劑盒20mgCOPS210605-21-7高端化學(xué)試劑N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶50(NαA50)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào):牛肉膏蛋白胨瓊脂723-46-650-99-796T套膜蛋白(iNV)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%腸道病71型檢測(cè)試劑盒100mgCOPS2 Ab10605-21-7高端化學(xué)試劑鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(MAGT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
腸道病71型檢測(cè)試劑盒100mg腺苷-5'-二酸三鋰HPLC98%100mLenterovirus 71 virus你HPLC98%腸道病71型檢測(cè)試劑盒100mgCOPS2 Ab200mgCAS號(hào):牛肉膏蛋白胨瓊脂723-46-650-99-796T套膜蛋白(iNV)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%腸道病71型檢測(cè)試劑盒100mgCOPS2 Ab10605-21-7高端化學(xué)試劑鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(MAGT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào):麥康凱瓊脂723-46-6203191-10-096T鳥氨酸脫羧酶(ODC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%層粘連蛋白亞基γ-2檢測(cè)試劑盒20mgCCL110605-21-7高端化學(xué)試劑Kindlin 3蛋白(KIND3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
層粘連蛋白亞基γ-2檢測(cè)試劑盒20mg腺苷-5'-二酸三鋰HPLC98%100mLLAMC2 ELISA KitHPLC98%層粘連蛋白亞基γ-2檢測(cè)試劑盒20mgCCL1200mgCAS號(hào):麥康凱瓊脂723-46-6203191-10-096T鳥氨酸脫羧酶(ODC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%層粘連蛋白亞基γ-2檢測(cè)試劑盒20mgCCL110605-21-7高端化學(xué)試劑Kindlin 3蛋白(KIND3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào):麥芽汁瓊脂723-46-6461432-26-896T粘著斑激酶(FAK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%層粘連蛋白β1檢測(cè)試劑盒20mgRIG-I23564-05-8高端化學(xué)試劑Kindlin 1蛋白(KIND1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
層粘連蛋白β1檢測(cè)試劑盒20mg8-氟-4-羥基-2-三氟甲基喹啉HPLC98%100mLLaminin β1,LN-β1 ELISA KitHPLC98%層粘連蛋白β1檢測(cè)試劑盒20mgRIG-I200mgCAS號(hào):麥芽汁瓊脂723-46-6461432-26-896T粘著斑激酶(FAK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%層粘連蛋白β1檢測(cè)試劑盒20mgRIG-I23564-05-8高端化學(xué)試劑Kindlin 1蛋白(KIND1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào):麥芽汁肉湯25316-40-9199796-52-696T微管關(guān)聯(lián)蛋白6(MAP6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%層粘連蛋白-5檢測(cè)試劑盒20mgCoxV-B323564-05-8高端化學(xué)試劑Sentan蛋白(SNTN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 魚特定基因序列;PCR試劑盒;50T;FSP2772;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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