PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：馬特定基因序列PCR 試劑盒
英文名稱：詳見說(shuō)明書
編號(hào)： FSP2592
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human LARP4 ELISA KitHuman ABCC6(Multidrug resistance-associated protein 6) ELISA Kit6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉大鼠腦脊神經(jīng)元

Human LARS2 ELISA KitHuman ABCC12(Multidrug resistance-associated protein 9) ELISA Kit6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

Human LARS ELISA KitHuman RASGRP3(Ras guanyl-releasing protein 3) ELISA Kit雙(二苯基膦苯基醚)二氯化鈀(II)大鼠顆粒細(xì)胞

Human Langerin ELISA KitHuman ABCB4(Multidrug resistance protein 3) ELISA Kit雙(二苯基膦苯基醚)二氯化鈀(II)大鼠海馬神經(jīng)元

Human LAS1L ELISA KitHuman VTN(Vitronectin) ELISA Kit二苯基環(huán)丙烯酮大鼠黑質(zhì)神經(jīng)元

Human KRT80 ELISA KitHuman RBM24(RNA Binding Motif Protein 24) ELISA Kit二苯基環(huán)丙烯酮大鼠紋狀體神經(jīng)元

Human KRT6B ELISA KitHuman ABCB5(ATP-binding cassette sub-family B member 5) ELISA Kit對(duì)苯二甲酸二辛酯大鼠腹脊髓神經(jīng)元

Human KTELC1 ELISA KitHuman INSL4(Early placenta insulin-like peptide) ELISA Kit2,5-二溴苯胺大鼠背脊髓神經(jīng)元
馬特定基因序列PCR 試劑盒葡聚糖T500CCDC90A卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90A抗體HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit人肝輔因子Ⅱ人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA Kit，48T/96T 葡聚糖T1000特價(jià)供應(yīng)CCDC51卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白51抗體AFP ELISA Kit大鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA Kit，48T/96T 葡聚糖T2000現(xiàn)貨促銷CCDC125卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體AECA(Mouse anti-endothelial cell antibody) ELISA Kit小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體猴子熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA Kit，48T/96T 聚蔗糖70特價(jià)促銷CCDC37卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體CA(Human Cholic acid) ELISA Kit人膽大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA Kit，48T/96T 
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。