產(chǎn)品名稱：肺炎衣原體PCR檢測試劑盒
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2486
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
人腎足細(xì)胞anti- ZNF785 antibody疊氮磷酸二苯酯HUM, 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞

人食管成纖維細(xì)胞，HEF細(xì)胞anti- ZNF839 antibody疊氮磷酸二苯酯HAVSMC, 人主動脈平滑肌細(xì)胞

人食管平滑肌細(xì)胞，HESMCC細(xì)胞anti- ZNF846 antibody3,3'-二氨基聯(lián)苯胺LX-2, 人肝星形細(xì)胞株

人食管上皮細(xì)胞，HEECP細(xì)胞anti- ZNHIT1 antibody3,3'-二氨基聯(lián)苯胺3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞

人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞anti- ZNHIT2 antibody3,3'-二氨基聯(lián)苯胺腫瘤細(xì)胞

人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞，HEMEC細(xì)胞anti- ZNRF2-Specific antibodyD-賴氨酸鹽酸鹽MCF-7（MCF7）（ATCC來源）, 人乳腺癌細(xì)胞

人輸卵管平滑肌細(xì)胞anti- ZnT3 antibodyD-賴氨酸鹽酸鹽MDA-MB-231（ATCC來源）, 人乳腺癌細(xì)胞

人輸卵管上皮細(xì)胞anti- Znt5 antibodyD-賴氨酸鹽酸鹽Raji，人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
肺炎衣原體PCR檢測試劑盒Saccharomyces cariocanus Naumov et al., tel ..Mouse Anti-human IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗人IgG 恩替卡韋一水合物磺胺喹噁啉(SQX)ELISA快速檢測試劑盒（檢組織/蜂蜜/血清/尿樣/乳制品，靈敏度1ppb，一步法）

Tubulinosema ratisbonensis/|Mouse Anti-human IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗人IgG 5-甲氧基煙酸磺胺嘧啶（SDZ）ELISA快速檢測試劑盒（檢組織/蜂蜜/血清/尿液/牛奶，靈敏度1ppb，一步法）

Penicillium onobense Ramirez et Martinez, a ..Mouse Anti-human IgG/Bio  生物素標(biāo)記的小鼠抗人IgG 戊酸酐磺胺二甲基嘧啶（SM2）ELISA快速檢測試劑盒（檢組織/尿樣/蜂蜜/血清/乳制品，靈敏度1ppb,一步法）

Escherichia coli (Migula) Castellani and Ch ..Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgG 4-溴吡啶-2-氨基甲酸叔丁酯喹乙醇代謝物(MQCA）ELISA檢測試劑盒（檢組織/飼料，靈敏度0.2ppb，兩步法）

Mus musculus, mouseMouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗人IgG 4,5-二氯氨茴酸慶大霉素(Gen)ELISA快速檢測試劑盒（檢組織/肝臟/乳制品，靈敏度0.05ppb，一步法）

Bartonella volansI/Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗人IgG 2-氨基-3-碘苯甲酸己烯雌酚快速檢測試劑盒(檢組織/飼料/尿樣，靈敏度0.1ppb，兩步法)

frozenMouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgG Spiro-MeOTAD安定類藥物ELISA快速檢測試劑盒(檢組織/尿樣/飼料，靈敏度0.1ppb，兩步法)

Homo sapiens, humanMouse Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 2-羥基-2-(4-溴苯基)丙烷鏈霉素(Strep)ELISA檢測試劑盒（檢雞肉組織/牛奶/蜂蜜，靈敏度0.1ppb,兩步法）