PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱：蛇形毛圓線蟲PCR試劑盒
英文名稱：Trichostongylus colubiformisPCR
編號： FSP2333
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。
數據采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產品中所含的熒光染料在不結合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數據處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555Alexa Fluor 555標記的小鼠抗牛IgG特價促銷anti- TCERG1 antibody雷尼鈷1,4-環(huán)己烷二羧酸二甲酯
Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647Alexa Fluor 647標記的小鼠抗牛IgG特價促銷anti- TCF12/HEB antibody4-氯-2-氰基吡啶3-甲基-1,3丁二醇
Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5PE-Cy5.5標記的小鼠抗牛IgG特價促銷anti- TCF4 antibody2-氯-5-甲基-3-硝基吡啶4-硝基鄰苯二甲酸酐
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy3Cy3標記的小鼠抗豚鼠IgG特價促銷anti- TCF7 antibody2-氯-5-甲基-3-硝基吡啶4-氰基苯甲酰氯
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5Cy5標記的小鼠抗豚鼠IgG特價促銷anti- TCF7L1 antibody8-氯喹啉N,N-二芐基羥胺
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgG特價促銷anti- TCF7L2 antibody8-氯喹啉2,4-癸二烯酸乙酯
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy7Cy7標記的小鼠抗豚鼠IgG特價促銷anti- TCHP antibody2-氯吡啶-5-硼酸頻哪醇酯1,5-雙(二苯基膦)戊烷
Mouse Anti-Guinea pig IgG/PEPE標記的小鼠抗豚鼠IgG特價促銷anti- TCIRG1 antibody2-氯吡啶-5-硼酸頻哪醇酯1,6-雙(二苯基膦基)己烷
蛇形毛圓線蟲PCR試劑盒Rat endotoxin,ET ELISA試劑盒phospho-AKT1/AKT2(Thr308+Thr309) 磷酸化蛋白激酶B抗體3,5-二氟芐醇禽皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA試劑盒phospho-AKT1(Ser129) 磷酸化蛋白激酶B抗體甲基辛基甲酮禽皰疹病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA試劑盒phospho-Akt(Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗體(R)-1-乙酰-3-吡咯烷醇禽皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Eotaxin 1 ELISA試劑盒Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化組蛋白去乙?；?/5/7抗體2-(4-溴甲基苯基)丙酸陰道加德納菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat epidermal growth factor receptor,EGFR ELISA試劑盒Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶4/5/7抗體肌氨酸乙酯鹽酸鹽馬虻探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Epidermal growth factor,EGF ELISA試劑盒 hnRNP K 異質核糖核蛋白K抗體6-[環(huán)己基(甲基)氨基]嘧啶-3-硼酸頻哪醇酯地霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA試劑盒phospho-AKT1(Thr34) 磷酸化蛋白激酶B抗體2-氨基嘧啶-5-硼酸頻哪酯蓋塔病毒探針法熒光定量RT-探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA試劑盒Seladin 1/DHCR24 24脫氫膽固醇還原酶抗體4-(1-ACETAMIDOCYCLOPROPYL)PHENYLBORONIC ACID, PINACOL ESTER腸賈第蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關鍵字： 蛇形毛圓線蟲;PCR試劑盒;50T;FSP2333;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學，暨南大學，南京工業(yè)大學，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。
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