產(chǎn)品名稱：支原體通用PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma spp.PCR
編號： FSP1955
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Glycogen synthase 1葡萄糖合成酶1抗體特價促銷anti- NDUFA8 antibody4-氨基煙酸20-羥基蛻皮甾酮

Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641)磷酸化葡萄糖合成酶1抗體特價促銷anti- NDUFA9 antibody4-氨基煙酸楊梅素

Glycogen synthase 2葡萄糖合成酶2抗體特價促銷anti- NDUFAF1 antibody硬酯酸鋁益母草苷

GSK-3 Beta (CT)葡萄糖合成激酶-3β抗體特價促銷anti- NDUFAF2 antibody1H-吡唑-1-甲脒鹽酸鹽野黃芩素

GSK-3 Beta (CT)葡萄糖合成激酶-3β抗體特價促銷anti- NDUFAF4 antibody1H-吡唑-1-甲脒鹽酸鹽染料木苷

phospho-GSK-3 Beta(Ser9)磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體特價促銷anti- NDUFB1 antibody2-氨基苯甲醛丁香酸

phospho-GSK-3 Beta(Thr390)磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體特價促銷anti- NDUFB10 antibody2-氨基苯甲醛3,5-二甲氧基-4-羥基肉桂酸，芥子酸

phospho-GSK-3 Beta(Ser21+Ser29)磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體特價促銷anti- NDUFB11 antibody2-氨基苯甲醛東莨菪甙； 東莨菪苷
支原體通用PCR試劑盒Rca I (Bsp HI)CD26  CD26抗體亞油酸甲酯L-Glutathione,Oxidized　氧化型谷胱甘肽

Pin AI (Age I)IL-2R gamma/CD132  白介素2受體γ鏈抗體亞油酸甲酯L-Glutathione,Oxidized　氧化型谷胱甘肽

Pin AI (Age I)CD272/BTLA  B和T淋巴細胞衰減蛋白抗體月桂酸甲酯Fluorescein isothiocyanate 異硫氰酸熒光素

Tru 9 ITBRG1  轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白1抗體月桂酸甲酯2,1,3-Benzothiadiazole 2,1,3-苯并噻二唑

Cel IICDKN2B/p15 INK4b  細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B抗體硬脂酸甲酯SILWETL-77表面活性劑

Mun I (Mfe I)CD2AP  白細胞分化抗原CD2AP抗體硬脂酸甲酯Food Yellow 3 日落黃

Asp EICD1A  T淋巴細胞CD1A抗體棕櫚酸甲酯Poly-D-lysine hydrobromide 多聚右旋賴氨酸（3-7萬） 多聚-D-賴氨酸

Eco RII (Bst NI)CD1a/Cortical thymocyte antigen CD1A  T淋巴細胞CD1抗體棕櫚酸甲酯Poly-D-lysine hydrobromide 多聚右旋賴氨酸（15～30萬） 多聚-D賴氨酸