PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱：猿分支桿菌PCR定量試劑盒
英文名稱：Mycobacterium simiaePCR
編號： FSP1929
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產品中所含的熒光染料在不結合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
GABRG2/GABA A Receptor gamma 2γ氨基γ2受體抗體特價促銷anti- MTMR7 antibody呋喃唑酮(AOZ)代謝物快速檢測試紙條（雞肉/水產品，檢測限0.5ppb,比色法）水飛薊?。?水飛薊亭

phospho-GABRG2(Ser327)磷酸化γ氨基γ2受體抗體特價促銷anti- MTMR8 antibody呋喃妥因(AHD)代謝物快速檢測試紙條（雞肉/水產品，檢測限0.5ppb,比色法）20(S)-原人參三醇

GAD65谷氨酸脫羧酶-65抗體特價促銷anti- MTNR1B antibody呋喃西林（SEM）代謝物快速檢測試紙條（雞肉/水產品，檢測限0.5ppb,比色法）遼東楤木皂苷V

RHCERh血型C抗原抗體特價促銷anti- MTO1 antibodyβ興奮劑類殘留快速檢測卡（檢尿樣，檢測限3ppb,消線法）雷公藤紅素; 南蛇藤素

GAD67谷氨酸脫羧酶-67抗體特價促銷anti- MTOR antibody呋喃唑酮代謝物(AOZ)快速檢測試劑卡（組織/雞蛋/蜂蜜，檢測限0.5ppb,比色法）白屈菜紅堿

Styk1絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶STYK1抗體特價促銷anti- MTP18 antibody替米考星ELISA快速檢測試劑盒（檢雞肉/豬肉，靈敏度0.5ppb，一步法）鹽酸去氫駱駝蓬堿

GAD65谷氨酸脫羧酶-65抗體(C端）特價促銷anti- MTPN antibody沙丁胺醇-克倫特羅兩聯(lián)快檢卡（檢尿樣，檢測限3-5ppb,消線法）人參皂苷Ro

GADD34生長抑制DNA損傷基因34抗體特價促銷anti- MTR antibody苯乙醇胺A檢測試劑盒（檢組織/飼料，靈敏度0.1ppb,一步法）千金子二萜醇
猿分支桿菌PCR定量試劑盒Bovine serum Albumin Cohn Fraction V Borellia and Leptospira Growth tested, pH5.2, EU approved, 5KGDFF-40beta/CAD/CPAN  Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體 1-哌啶丙酸DL-Phenylalanine DL-苯丙氨酸

Bovine serum Albumin Cohn Fraction V Borellia and Leptospira Growth tested, pH5.2, EU approved, 50gmCasein  酪蛋白抗體 2-溴-1-(2,4-二甲基苯基)乙酮Eosin Y 伊紅Y(醇溶)

Bovine serum Albumin Cohn Fraction V Borellia and Leptospira Growth tested, pH5.2, EU approved, 500gmCalcineurin A/PP-2B alpha 1  鈣調磷酸酶抗體 5-氟-2-甲氧基煙酸Eosin Y 伊紅Y(醇溶)

Bovine serum Albumin Cohn Fraction V Borellia and Leptospira Growth tested, pH5.2, EU approved, 1KGCaldesmon  鈣介質素抗體 4-溴-3-氟苯磺酰胺SDS 十二烷基硫酸鈉 Sigma

Bovine serum Albumin Cohn Fraction V Borellia and Leptospira Growth tested, pH5.2, EU approved, 10KGphosphor-Caldesmon(Ser789)  磷酸化鈣介質素抗體 α-溴代-3,4-二氯苯乙酮SDS 十二烷基硫酸鈉 Sigma

Bovine serum Albumin Cohn Fraction V Borellia and Leptospira Growth tested, pH5.2, EU approved, 100gmCalpain 1  鈣蛋白酶1抗體 3-氟苯丙氨酸SDS 十二烷基硫酸鈉 Sigma

Bovine Gamma Globulin Lyophilized Powder >= 96%, 1KGCalpain 2  鈣激活的中性蛋白酶2抗體 2-碘苯甲醛Verapamil Hydrochloride 維拉帕米鹽酸鹽

Bovine Gamma Globulin Lyophilized Powder >= 96%, 1gCalponin 1/COLP  鈣調節(jié)蛋白-1抗體 2,4-二氯煙酸Verapamil Hydrochloride 維拉帕米鹽酸鹽
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。