產(chǎn)品名稱：灰馬杜拉分枝菌PCR定量試劑盒
英文名稱：Madurella griseaPCR
編號： FSP1857
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Cytochrome C細(xì)胞色素C抗體特價促銷anti- LRRC8C antibody細(xì)胞肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE）總活性比色法定量檢測試劑盒鋅指蛋白Zdhhc18抗體

USP28泛素特異性蛋白酶28抗體特價促銷anti- LRRC8D antibody細(xì)胞肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE I）活性比色法定量檢測試劑盒鋅指蛋白Zdhhc12抗體

p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain細(xì)胞色素b245輕鏈抗體特價促銷anti- LRRTM1 antibody細(xì)胞肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶II（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE II）活性比色法定量檢測試劑盒鋅指蛋白201抗體

Desmoglein 2橋粒芯糖蛋白2抗體特價促銷anti- LRRTM2 antibody組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE）活性比色法定量檢測試劑盒鋅指蛋白Zic2抗體

Cadherin like 23鈣粘蛋白23抗體特價促銷anti- LRRTM4 antibody組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE I）活性比色法定量檢測試劑盒磷酸化ZCWCC1抗體

DAAM1形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體特價促銷anti- LRSAM1 antibody組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶II（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE II）活性比色法定量檢測試劑盒鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27抗體

phospho-DAAM1 (Thr361)磷酸化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體特價促銷anti- LRWD1 antibody細(xì)胞短鏈脂酰輔酶A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒鋅指蛋白423抗體

Phospho-Dab1 (Tyr220)磷酸化Disabled 1抗體特價促銷anti- LSAMP antibody細(xì)胞中鏈脂酰輔酶A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒受精卵抑制蛋白1抗體
灰馬杜拉分枝菌PCR定量試劑盒500bp ladderphospho-Androgen Receptor(Ser595)  磷酸化雄激素受體抗體 癸二酰肼Chalcone；查爾酮/苯亞甲基苯乙酮

Lambad DNA/HindIIIARHI  抑癌基因ras同源家族1抗體 5-硝基糠醛二乙酸酯Piperine；胡椒堿

1kb ladder plusphospho-Androgen Receptor (Ser212)  磷酸化雄激素受體抗體 N-乙基-N-羥乙基苯胺Gypenoside XLVI；絞股藍(lán)皂苷XLVI

1kb ladderAmphiregulin  雙調(diào)蛋白（結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子）抗體 3-(N,N-二甲基氨基)丙烯酸乙酯Butyl paraben；對羥基苯甲酸丁酯

Maeker 13AKR1B1  醛糖還原酶抗體 丁二酸二異丙酯2-Acetylacteoside；2-乙?；蠖∠惴榆?/span>

DSTM 15000ARA24  雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 乙醛酸乙酯Ophiopogonin D；麥冬皂苷D

200bp ladderphospho-Androgen Receptor(Ser660)  磷酸化雄激素受體抗體 1-丁基十氫萘Pyriproxifen；吡丙醚

Marker 12ARC/Arg3.1  ARC抗體 5-溴-2-氯苯基異腈酸酯Isoliquiritigenin；異甘草素