中文名稱:高致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR定量試劑盒 | 英文名稱:Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome VirusPRRSVRTPCR |
保存條件: 低溫冷藏 | 純度規(guī)格: 詳見說明書 |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 |
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:高致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR定量試劑盒
英文名稱:Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV)RTPCR
編號: FSP1755
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
BSEP/ABCB11膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體特價促銷anti- HSPH1 antibody組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2(TIMP-2)活性熒光定量檢測試劑盒泛素樣蛋白Sumo3抗體
Bone sialoprotein骨涎蛋白抗體特價促銷anti- HTATSF1 antibody體液基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2(TIMP-2)活性熒光定量檢測試劑盒肺表面活性蛋白C前體肽抗體
BTG2/TIS21B細(xì)胞遷移基因2抗體特價促銷anti- HTF9C antibody冰凍切片基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)原位明膠酶譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒Syndecan 3蛋白抗體
BTK/ATK蛋白酪氨酸激酶ATK抗體特價促銷anti- HTR3A antibody細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)原位明膠酶譜法(in situ ?zymography)熒光染色試劑盒磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體
Phospho-Btk(Ser180)磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體特價促銷anti- HTR4 antibody冰凍切片基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)原位明膠酶譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體
Phospho-BTK/BPK(Tyr223)磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體特價促銷anti- HTRA1 antibody細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)原位明膠酶譜法(in situ ?zymography)熒光染色試劑盒神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1抗體
BAP135/TFII I蛋白酪氨酸激酶BAP135抗體特價促銷anti- HTRA2 antibody無脊椎動物和昆蟲細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)總活性熒光定量檢測試劑盒互養(yǎng)蛋白2抗體
RAD9細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體特價促銷anti- HTRA4 antibody無脊椎動物和昆蟲組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)總活性熒光定量檢測試劑盒互養(yǎng)蛋白3抗體
高致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR定量試劑盒PowerPlex?1.1 SystemSIP1 Smad蛋白相互作用蛋白1抗體瘧原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Food Yellow 3;食品黃3/日落黃
PowerPlex?16 HS SystemPTPH1/PTPN3 蛋白酪氨酸磷酸酶H1抗體鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒Isosteviol;異甜菊醇
TransFastTM Transfection ReagentPROCA1 Cyclin A1相互作用蛋白抗體類志賀鄰單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒Picroside I;胡黃連苷I
TfxTM-20 ReagentZNF354C 鋅指蛋白354C抗體卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Gambogic acid;藤黃酸
TfxTM-50 ReagentSLFN14 Schlafen家族14抗體耶氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Cyanidin-3-O-Galactoside;矢車菊素-3-O-半乳糖苷
Transfectam?Reagent for the Transfection of Eukaryotic CellsSEMCAP3/LNX3 SEMCAP3蛋白抗體肺孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒Sorafenib tosylate;索拉非尼
ProFection甅ammalian Transfection System-Calcium PhosphateMLT5 睪丸特異性MLT5蛋白抗體多瘤病毒探針法熒光定量PCR試劑盒,停產(chǎn)Euphobiasteroid;千金子甾醇
Luciferin-EF™LST1 淋巴細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)運蛋白1抗體豬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒Fraxinellone;梣酮
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
成立日期 | 2012-05-02 (13年) | 注冊資本 | 550 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué) | 經(jīng)營模式 | 貿(mào)易,工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥3990 |
VIP6年
|
上海澤葉生物科技有限公司
|
2025-02-27 | |
¥1490 |
VIP6年
|
上海康朗生物科技有限公司
|
2025-02-27 | |
¥3980 |
VIP4年
|
上海雅吉生物科技有限公司
|
2025-02-27 |