儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:乙型肝炎病毒通用型PCR定量試劑盒
英文名稱:Hepatitis B Virus(HBV)PCR
編號(hào): FSP1743
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PKMYT1髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體特價(jià)促銷anti- HORMAD1 antibody細(xì)胞組織蛋白酶K(CATHEPSIN K)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒RNA結(jié)合蛋白26抗體
phospho-PKMYT1(Thr495)磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體特價(jià)促銷anti- HOXA11 antibody組織樣品組織蛋白酶K(CATHEPSIN K)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒Nogo66受體相關(guān)蛋白3抗體
BBC3/PUMAp53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體特價(jià)促銷anti- HOXA2 antibody細(xì)胞組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒RNA尿苷酸合酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
Keratan Sulfate硫酸角質(zhì)素抗體特價(jià)促銷anti- HOXA9 antibody組織樣品組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒環(huán)指蛋白138抗體
Salmonella tropina沙門氏菌菌體蛋白抗體特價(jià)促銷anti- HOXB1 antibody血液組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒RAN結(jié)合蛋白1抗體
ARHGAP20Rho GTP酶激活蛋白20抗體特價(jià)促銷anti- HOXB1 antibody體液組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒環(huán)指蛋白150抗體
BCHE (NT)丁酰膽堿酯酶抗體(N端)特價(jià)促銷anti- HOXB7 antibody細(xì)胞組織蛋白酶D(CATHEPSIN D)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒Rad52抗體
BCHE(1E8)丁酰膽堿酯酶單克隆抗體特價(jià)促銷anti- HOXC10 antibody組織樣品組織蛋白酶D(CATHEPSIN D)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒RAN結(jié)合蛋白3抗體
乙型肝炎病毒通用型PCR定量試劑盒2×PCR Master MixFBXO4 FBXO4蛋白抗體絲狀支原體山羊亞種探針法熒光定量PCR試劑盒Procyanidin B1;原花青素B1
RNase inhibitor/ RNase抑制劑FBXO28 FBXO28蛋白抗體口腔支原體探針法熒光定量PCR試劑盒Arctiin;牛蒡子苷/牛蒡苷
D-Luciferin, Potassium Salt/D-熒光素鉀鹽FBXO27 FBXO27蛋白抗體肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒Parthenolide;小白菊內(nèi)酯
Ethyl methanesulfonate(EMS)甲基磺酸乙酯FBXO24 FBXO24蛋白抗體支原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒Calycosin;毛蕊異黃酮
silwet L-77 hnRNP A2B1 異質(zhì)核糖核蛋白hnRNPA2抗體滑液支原體探針法熒光定量PCR試劑盒Oxytetracycline HCl;鹽酸土霉素
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1法)hnRNP U 異質(zhì)核糖核蛋白U抗體腦粘體蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Calycosin-7-O-β-D-glucoside;毛蕊異黃酮苷
JC-1線粒體膜電位檢測(cè)熒光染料AIM1L 黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體黏孢子蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒Neosperidin dihydrochalcone;新橙皮苷二氫查爾酮
zeocin鹽酸博萊霉素 細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)AHNAK2 AHNAK核蛋白2抗體納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒Saikosaponin C;柴胡皂苷C
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 乙型肝炎病毒通用型;PCR定量試劑盒;50T;FSP1743;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
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