PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱：馬輪狀病毒PCR試劑盒
英文名稱：Equine RotavirusRTPCR
編號： FSP1636
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
SLC39A11溶質(zhì)載體家族39成員11抗體特價促銷anti- FKBP3 antibody細(xì)胞一氧化氮合成酶總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒腦胰蛋白酶3抗體

XTP4乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體特價促銷anti- FKBP5 antibody組織一氧化氮合成酶總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒前列腺癌相關(guān)蛋白2抗體

KCTD11鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體特價促銷anti- FKBP52 antibody血液一氧化氮合成酶總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒細(xì)胞表面受體PILRβ抗體

DERP6/C17orf81表皮源性蛋白6抗體特價促銷anti- FKBP52 antibody尿液一氧化氮合成酶總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒絲氨酸蛋白酶10抗體

ATG4A自噬相關(guān)蛋白4A抗體特價促銷anti- FKBP6 antibody一氧化氮合成酶（NOS）總活性終點(diǎn)比色法定量檢測試劑盒酸性磷酸酶抗體

C17orf4217號染色體開放閱讀框42抗體特價促銷anti- FKBP6 antibody細(xì)胞乳酸脫氫酶（LDH）總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒前列腺酸性磷酸酶抗體

C17orf4917號染色體開放閱讀框49抗體特價促銷anti- FKBP7 antibody組織乳酸脫氫酶（LDH）總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒三磷酸腺苷受體受體P2X3抗體

APG4B/AUTL1自噬相關(guān)蛋白4B抗體特價促銷anti- FKBP8 antibody血液乳酸脫氫酶（LDH）總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒乳腺癌相關(guān)蛋白DRES17抗體
馬輪狀病毒PCR試劑盒AdenovirusSUPT16H/CDC68  染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體鹽酸沃尼妙林鹽酸坦洛新進(jìn)口/國產(chǎn)LAPTM4B  溶酶體蛋白跨膜β4抗體含量：HPLC法含量測定用

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..MEGF5/Slit3  復(fù)合型表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體乙烯基溴普伐他汀鈉進(jìn)口/國產(chǎn)LDOC1/BCUR1  癌癥亮氨酸拉鏈下調(diào)因子1抗體含量：HPLC法含量測定用

Tremella resupinata ChenTRIM29/ATDC  共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥D相關(guān)蛋白抗體乙烯基溴比洛芬酯進(jìn)口/國產(chǎn)LOXL2  氨?；赶嚓P(guān)蛋白2抗體含量：含量測定

Microbacterium lacticum Orla-JensenUBE2V1/UEV1A  泛素結(jié)合酶E2變異體1抗體硫酸長春新堿芐達(dá)氨酸雜質(zhì)A（3-羥-1-芐吲唑）進(jìn)口/國產(chǎn)LRRN5  富含亮氨酸重復(fù)神經(jīng)元5抗體含量：TLC檢查

Paenibacillus macerans (Schardinger) Ash et ..VHLH/Von Hippel Lindau  腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體（逢希伯-林道氏?。┝蛩衢L春新堿鹽酸舍曲林進(jìn)口/國產(chǎn)Lipophilin B  親脂性蛋白B抗體含量：HPLC法含量測定

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Cyclin B3  周期素B3抗體乙烯基三甲氧基硅烷馬來酸依那普利進(jìn)口/國產(chǎn)MAG1  肺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白抗體含量：HPLC法含量測定

Staphylococcus aureusCCNDBP1/GCIP  周期素D結(jié)合蛋白1抗體乙烯基三甲氧基硅烷依那普利雙進(jìn)口/國產(chǎn)MARVELD1  候選腫瘤抑制因MARVELD1抗體含量：HPLC檢查

Fusarium sporotrichioides Sherbakoff, anamo ..AFF4  淋巴細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體1-乙烯基咪唑依那普利拉進(jìn)口/國產(chǎn)MOBK1B/C2orf6  2號染色體開放閱讀框6抗體含量：HPLC系統(tǒng)適應(yīng)性檢查
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。