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therapeutics-n-terminal-sequence
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發(fā)貨地 北京
更新日期 2024-07-04

產品詳情

英文名稱:therapeutics-n-terminal-sequence產品類別: 生物制藥分析
2024-07-04 therapeutics-n-terminal-sequence therapeutics-n-terminal-sequence 1次/RMB 生物制藥分析

Edman降解(埃德曼降解)法,是由菲爾•埃德曼(Pehr Edman)首先創(chuàng)立用于肽鏈或蛋白質中N-端氨基酸序列分析的方法。Edman降解法檢測的原理非常簡單,在堿性條件下反應,用異硫氰酸苯酯(Phenylisothiocyanate, PITC)與待檢測的蛋白質(多肽)的N-端氨基生成苯氨基硫甲酰(PTC)的衍生物,然后處理-關環(huán)-選擇性切斷肽鏈N-端,得到N-端氨基酸殘基的噻唑啉酮苯胺衍生物。接著用有機溶劑萃取衍生物,在酸的作用下,不穩(wěn)定的衍生物轉變?yōu)榉€(wěn)定的的乙內苯酰硫脲(PTH)衍生物,余下肽鏈中的酰胺鍵不受影響。通過用HPLC或電泳法分析生成的乙內酰苯硫脲氨基酸(PTH-氨基酸),可以鑒定出氨基酸類別。重復氨基酸鑒定反應可以達到對N端氨基酸按照從N端到C端的方向依次對氨基酸序列進行分析。對于序列較長的蛋白質(多肽),還可以將樣品先切成小的肽段,先對肽段序列分析,再將肽段信息進行拼接即可獲得完整蛋白質的序列信息。

百泰派克生物科技提供基于Edman降解對蛋白質(多肽)進行N端氨基酸序列分析的技術服務.

蛋白質N端測序流程

Edman降解法用于N端測序的優(yōu)點:

1. PITC與所有氨基酸殘基的反應產率和回收率高,因此副產物少,可通過色譜進行準確鑒定;
2. 反應時間快,對于大多數氨基酸殘基來說,30min耦合時間,5min切割反應時間即可;
3. 反應后的肽鏈仍然是完整的,可用Edman降解法重復測定新生的N末端氨基酸。

Edman降解法用于N端測序需要注意的問題:

1. 樣品純度需 >90%, 鹽離子含量在50mmol/L之內,不含SDS等變性劑,N端必須是均一的高純樣品;
2. 10Pmol 樣品可以測定20 aa;
3. 液體樣品不能含有蛋白酶,建議盡早測試,防止時間太長容易降解;
4. 轉膜樣品在轉膜前不宜放置太久以防樣品擴散,轉膜后可密封保存3-6個月, 建議使用Coomassie R-250進行染色,電泳緩存液建議使用CAPS buffer;
5. 樣品無信號峰是,建議蛋白進行N-端封閉;
6. 建議整個反應過程中盡可能使用高純buffer。

案例分析:

百泰派克生物科技采用島津公司推出的PPSQ系列儀器實現對蛋白或者多肽樣品N端氨基酸序列的分析,可以分析N端30個以上的氨基酸。以下是我們對某一蛋白藥物進行分析的實際色譜結果,該項目對樣品中蛋白藥物的前15個氨基酸進行了分析。從下圖(第15個氨基酸的色譜圖)可以看出,色譜峰值仍然非常高,可以得到非常準確的結果。

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

中/英文項目報告

在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:

1. 實驗步驟(中英文)
2. 相關的質譜參數(中英文)
3. 質譜圖片
4. 原始數據
5. 生物藥物N端序列信息

生物制藥N端測序一站式服務

您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告

關鍵字: 生物制藥N端測序;

公司簡介

北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd. 簡稱BTP)成立于2015年,是國家級高新技術企業(yè),業(yè)務范圍主要圍繞蛋白和小分子代謝物檢測兩大板塊,從事蛋白質和小分子代謝物的理化性質分析及結構解析等相關技術服務,為客戶提供高性價比、高效率的技術服務。深耕蛋白鑒定、定量蛋白組(iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATH)、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗體測序、蛋白修飾(二硫鍵、糖基化、磷酸化、乙?;?、泛素化等)、靶向和非靶向代謝物檢測。 百泰派克生物科技檢測平臺包括:檢測分析平臺、蛋白質組學分析平臺、代謝組學分析平臺、蛋白質從頭測序平臺、生物制藥分析平臺和流式細胞多因子檢測平臺。公司擁有獨立的質譜實驗室、色譜實驗室、細胞培養(yǎng)室和免疫學實驗室,以及高分辨率質譜儀和高效液相色譜。目前已與國內外多家藥物研發(fā)企業(yè),以及哈佛大學、北京大學在內的國內外高校建立了合作關系,協(xié)助客戶發(fā)表了多篇中英文文章,包括Cell等多家高水平期刊。 公司自主檢測平臺發(fā)展至今,已覆蓋蛋白質組學、代謝組學、生物制藥、生信分析等多組學檢測平臺,積累了豐富的實踐經驗,憑借專業(yè)的技術和優(yōu)質的服務水平,客戶覆蓋北京大學、清華大學、中科院等多所知名院校,也與國內外多家藥物研發(fā)企業(yè)建立合作關系。公司始終致力于為各科研院校、企業(yè)和機構提供高效、準確、高性價比的蛋白質(組)研究技術包裹,助力客戶在基礎研究、分子診斷及其他生命科學研究領域取得突破,為生命科學的發(fā)展做出貢獻。 百泰派克技術平臺 檢測分析平臺:多臺高分辨率質譜儀、高效液相色譜、氣相色譜,NMR。 蛋白質組分析平臺:Label-free、iTRAQ、SILAC、SWATH、MRM;蛋白質定性定量鑒定、蛋白質差異分析、發(fā)現疾病標記物、發(fā)現藥物靶標。 代謝組分析平臺:靶向代謝組學、非靶向代謝組學、脂質組學分析;通量達1000種代謝分子、代謝通路分析、代謝靶標鑒定。流式細胞多因子檢測平臺:CBA、FlowCytomix;微量樣品需求,分析多種細胞因子。 蛋白質從頭測序平臺:Obitrap Fusion Lumos質譜儀、PEAKS軟件分析;100%序列測定,精準蛋白、抗體測序。 生物制藥分析平臺:生物藥物鑒定、變異性分析、純度分析。 流式細胞多因子檢測平臺:CBA、FlowCytomix;微量樣品需求,分析多種細胞因子。 聯系我們: 科研服務電話:010-57231915 手機:152-0137-7680 微信:13717565893 QQ:3158880571 網址:www.biotech-pack.com 郵箱:info@biotech-pack.com 地址:北京市經濟技術開發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號院
成立日期 2015-12-23 (10年) 注冊資本 100萬
員工人數 10-50人 年營業(yè)額 ¥ 1000萬-5000萬
主營行業(yè) 生物技術服務 經營模式 服務
  • 北京百泰派克生物科技有限公司
非會員
  • 公司成立:10年
  • 注冊資本:100萬
  • 企業(yè)類型:有限責任公司
  • 主營產品:主要從事蛋白質理化性質分析及結構解析、以質譜技術為基礎的蛋白質組學代謝組學技術服務。
  • 公司地址:北京市朝陽區(qū)北新橋三條
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