抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱
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磷酸化活化復制因子2抗體
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英文名稱
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Anti-phospho-ATF2 (Ser480)
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規(guī)格
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0.1ml/100μg
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產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-phospho-ATF2 (Ser480)
中文名稱 磷酸化活化復制因子2抗體
別 名 ATF2 (phospho S480); p-ATF2 (phospho S480); p-ATF2 (phospho Ser480); ATF2(Phospho-Ser480); CREB 2; HB 16; Activating Transcription Factor 2; ATF 2; Atf-2; ATF2 protein; cAMP Response Element Binding Protein 2; cAMP response element binding protein CRE BP1; cAMP-dependent transcription factor ATF-2; cAMP-responsive element-binding protein 2; CRE BP1; CRE-BP; CREB 2; CREB2; CREBP1; Cyclic AMP dependent transcription factor ATF 2; Cyclic AMP-responsive; ATF2_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse
產品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 細胞生物 神經生物學 轉運蛋白 表觀遺傳學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 45kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human ATF2 around the phosphorylation site of Ser480
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
下列是磷酸化活化復制因子2抗體 的相關熱銷產品:
CKS2 ELISA Kit>98%肺表面活性物質相關蛋白C試劑盒
Claudin 23 ELISA Kit>98%肺表面活性物質相關蛋白B試劑盒
CREB1 ELISA Kit>95%肺表面活性物質相關蛋白A試劑盒
CREB3L2 ELISA Kit>95%肺表面活性蛋白D試劑盒
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CRMP1 ELISA Kit>95%腓骨蛋白2試劑盒
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CPOX(Coproporphyrinogen oxidase) ELISA KitEach g exchanges 1.8 g- 2.2 g of sodium glycocholate肥大細胞類胰蛋白酶試劑盒
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CREB1 ELISA Kit≥98%,BR非小細胞肺癌相關抗原211試劑盒
CKAP4 ELISA Kit>99%,AR非甲基化寡核苷酸試劑盒
CKS2 ELISA Kit>99%,分子生物學級防御素 elisa試劑盒
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Claudin 23 ELISA KitFMB Grade泛素結合酶E2D2試劑盒
CREB3L2 ELISA Kit分子生物學級,>60 U/mg,10 mg/ml泛素結合酶E2D1試劑盒
CREST ELISA Kit>99%,BR泛素激活酶試劑盒
CREB1 ELISA Kit>99%,分子生物學級泛素蛋白試劑盒
磷酸化活化復制因子2抗體 Pseudomonas│oryzihabitans種屬:Pseudomonas│oryzihabitans
分離基物:土壤
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應用領域:可以在含1000mg/l的芐磺隆的無機鹽培養(yǎng)基:中生長
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:33
生長條件:30℃
存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法棲稻假單胞菌